nefrНефрологияNephrology (Saint-Petersburg)1561-62742541-9439Pavlov First Saint-Petersburg State Medical Universitynefr-48Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯORIGINAL ARTICLES CLINICAL STUDIESВыявление виментина, панцитокератина, гладкомышечного актина, Е-катгерина и антител к CD-10 - маркеров эпителиально-мезенхимальной трансформации при хроническом гломерулонефритеIdentification of vimentin,pancytokeratin, smooth muscle actin, Е-katherin and antibodies TOCD-IO -markers of epithelial and mesenchymal transformation in chronic glomerulonephritisБатюшинМ. М.BatyushinM. M.batjushin-m@rambler.ruПасечникД. Г.PasechnikD. G.noemail@neicon.ruРостовский государственный медицинский университетRussian Federation2014010920141855258Copyright © Батюшин М.М., Пасечник Д.Г., 20142014Батюшин М.М., Пасечник Д.Г.Batyushin M.M., Pasechnik D.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.nephrolog.ru/jour/article/view/48

ЦЕЛЬ: изучить показатели эпителиально-мезенхимальной трансформации при гломерулонефрите. ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ. В исследование были включено 8 пациентов с различными формами хронического гломерулонефрита. Средний возраст больных составил 36,8 (от 22 до 60) лет. Для оценки эпителиального фенотипа клеток использовались моноклональные антитела (фирма DAKO, ready-to-use (RTU) к панцитокератину (клон АЕ1/АЕ3), Е-кадгерину (клон NCH-38), CD10 (клон 56C6), в качестве маркеров мезенхимальной дифференцировки использовались моноклональные антитела к виментину (клон V9) и альфа-гладкомышечному актину (клон 1A4). Оценка пролиферативной активности тубулярного эпителия проводилась с помощью антител к Ki67 (клон MIB-1). РЕЗУЛЬТАТЫ. Анализ маркеров ЭМТ показал следующее. В зонах, где отсутствовали признаки фиброза интерстиция экспрессия панцитокератина АЕ1/АЕ3 определялась вдоль мембраны и цитоплазме эпителия собирательных протоков коркового и мозгового вещества. В эпителии извитых канальцев реакция была менее выражена. Позитивная реакция с антителами к CD-10 отмечалась в эпителии и мезангиальных клетках клубочка, преимущественно по апикальной поверхности эпителия извитых и прямых канальцев, но отсутствовала в эпителии собирательных протоков. Экспрессия Е-кадгерина выявлялась только в эпителии кортикальных и медуллярных собирательных протоков. Маркер мезенхимальной дифференцировки виментин был позитивным в цитоплазме единичных клеток в извитых канальцах. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Исследование подтвердило возможность изменения эпителиального фенотипа на мезенхимальный клеток канальцев и протоков нефрона при различных формах гломерулонефритов. Данные изменения ассоциированы с развитием интерстициального фиброза. Увеличение количества пролиферирующих клеток в зонах ЭМТ возможно, связано с активацией репаративных процессов.

AIM: to study factors of epithelial and mesenchymal transformation in glomerulonephritis. PATIENTS AND METHODS. The study included 8 patients with various forms of chronic glomerulonephritis. Mean age of patients was 36.8 (22 to 60) years. To estimate epithelial cell phenotype we used monoclonal antibodies (company DAKO, ready-to-use (RTU) to pancytokeratin (clone AE1/AE3), E-cadherin (clone NCH-38), CD-10 (clone 56C6), as markers of mesenchymal differentiation we used monoclonal antibodies to vimentin (clone V9) and alpha-smooth muscle actin (clone 1A4). Evaluation of proliferative activity of tubular epithelium was performed with antibodies to Ki67 (clone MIB-1). RESULTS. EMT markers analysis showed the following. In areas where there were no signs of interstitial fibrosis pancytokeratin AE1/AE3 expression was determined along the membrane and cytoplasm of epithelial collecting ducts of cortex and medulla. In the epithelium of convoluted tubules reaction was less pronounced. Positive reaction with antibodies to CD-10 was observed in the epithelium and glomerular mesangial cells, mainly on the apical surface of convoluted and direct tubules epithelium, but was absent in the epithelium of collecting ducts. Expression of E-cadherin was revealed only in the epithelium of cortical and medullary collecting ducts. Differentiation mesenchymal marker vimentin was positive in the cytoplasm of single cells in convoluted tubules. CONCLUSION. The study confirmed possibility of changing of the epithelial phenotype to mesenchymal cells of the nephron tubules and ducts in various forms of glomerulonephritis. These changes are associated with the development of interstitial fibrosis. Increasing of number of proliferating cells in the areas of EMT possibly due to activation of reparative processes.

виментинЕ-кадгерингладкомышечный актинхронический гломерулонефритCD-10vimentinE-cadherinsmooth muscle actinCD-10chronic glomerulonephritisReferencesГалишон П., Гертиг А. Эпителиально-мезенхимальная трансформация как биомаркер почечного фиброза: готовы ли мы применить теоретические знания на практике? Нефрология 2013; 17 (4): 9-16.Галишон П., Гертиг А. Эпителиально-мезенхимальная трансформация как биомаркер почечного фиброза: готовы ли мы применить теоретические знания на практике? Нефрология 2013; 17 (4): 9-16.Репин В.С., Сабурина И.Н. Обратимые эпителиомезенхимальные траснформации клеток в эмбриогенезе и постнатальном обновлении тканей. Клет. транспл. и тканевая инженерия 2006; 1 (3): 64-72.Репин В.С., Сабурина И.Н. Обратимые эпителиомезенхимальные траснформации клеток в эмбриогенезе и постнатальном обновлении тканей. Клет. транспл. и тканевая инженерия 2006; 1 (3): 64-72.Biamonti G., Catillo M., Pignataro D. et al. The alternative splicing side of cancer. Semin Cell Dev Biol 2014; (14): 44-49.Biamonti G., Catillo M., Pignataro D. et al. The alternative splicing side of cancer. Semin Cell Dev Biol 2014; (14): 44-49.Schindeler A., Kolind M., Little D.G. Cellular transitions and tissue engineering. Cell Reprogram 2013; 15(2): 101-107.Schindeler A., Kolind M., Little D.G. Cellular transitions and tissue engineering. Cell Reprogram 2013; 15(2): 101-107.Kriz W., Kaissling B., Le Hir M. Epithelial-mesenchymal transition (EMT) in kidney fibrosis: fact or fantasy? J Clin Invest 2011; 121(2): 468-474.Kriz W., Kaissling B., Le Hir M. Epithelial-mesenchymal transition (EMT) in kidney fibrosis: fact or fantasy? J Clin Invest 2011; 121(2): 468-474.Pieczynski J., Margolis B. Protein complexes that control renal epithelial polarity. Am J Physiol Renal Physiol 2011; 300(3): 589-601.Pieczynski J., Margolis B. Protein complexes that control renal epithelial polarity. Am J Physiol Renal Physiol 2011; 300(3): 589-601.Lee J.M., Dedhar S., Kalluri R., Thompson E. The epithelialmesenchymal transition: new insights in signaling, development, and disease. J of Cell Biology 2006; 172(7): 973-981.Lee J.M., Dedhar S., Kalluri R., Thompson E. The epithelialmesenchymal transition: new insights in signaling, development, and disease. J of Cell Biology 2006; 172(7): 973-981.Lee K., Nelson C. New Insights into the Regulation of Epithelial-Mesenchymal Transition and Tissue Fibrosis. Int Review of Cell and Mol Biol 2012; (294): 171-221.Lee K., Nelson C. New Insights into the Regulation of Epithelial-Mesenchymal Transition and Tissue Fibrosis. Int Review of Cell and Mol Biol 2012; (294): 171-221.Galichon P., Hertig A. Epithelial to mesenchymal transition as a biomarker in renal fibrosis: are we ready for the bedside? Fibrogenesis Tissue Repair 2011; (6): 4-11.Galichon P., Hertig A. Epithelial to mesenchymal transition as a biomarker in renal fibrosis: are we ready for the bedside? Fibrogenesis Tissue Repair 2011; (6): 4-11.Коржевский Д.Э., Ленцман М.В., Гиляров А.В. и др. Индукция синтеза нестина в клетках головного мозга крысы под влиянием ишемического повреждения. Морфология 2007; 131 (1): 23-26.Коржевский Д.Э., Ленцман М.В., Гиляров А.В. и др. Индукция синтеза нестина в клетках головного мозга крысы под влиянием ишемического повреждения. Морфология 2007; 131 (1): 23-26.Коржевский Д.Э., Кирик О.В. Белки промежуточных филаментовнестин и виментин в клетках почки крысы. Морфология 2008; 134 (6): 50-55.Коржевский Д.Э., Кирик О.В. Белки промежуточных филаментовнестин и виментин в клетках почки крысы. Морфология 2008; 134 (6): 50-55.Sahli S., Stump B., Welti T. et al. A New Class of Inhibitors for the Metalloprotease Neprilysin Based on a Central Imidazole Scaffold. Helvetica Chimica Acta 2005; 88 (4): 707-730.Sahli S., Stump B., Welti T. et al. A New Class of Inhibitors for the Metalloprotease Neprilysin Based on a Central Imidazole Scaffold. Helvetica Chimica Acta 2005; 88 (4): 707-730.Чеботарёва Н.В., Бобкова И.Н., Варшавский В.А. и др. Роль гладкомышечного а-актина в развитии фиброза почек у больных хроническим гломерулонефритом. Тер. арх. 2006; 78 (5): 17-21.Чеботарёва Н.В., Бобкова И.Н., Варшавский В.А. и др. Роль гладкомышечного а-актина в развитии фиброза почек у больных хроническим гломерулонефритом. Тер. арх. 2006; 78 (5): 17-21.Humphreys B.D., Czerniak S., DiRocco D.P. et al. Repair of injured proximal tubule does not involve specialized progenitors. Proc of the Nat Acad of Sciences of the USA 2011; (108): 9226-9231Humphreys B.D., Czerniak S., DiRocco D.P. et al. Repair of injured proximal tubule does not involve specialized progenitors. Proc of the Nat Acad of Sciences of the USA 2011; (108): 9226-9231Scholzen T., Gerdes J. The Ki-67 protein: from the known and the unknown. J Cell Physiol 2000; 182 (3): 311-322.Scholzen T., Gerdes J. The Ki-67 protein: from the known and the unknown. J Cell Physiol 2000; 182 (3): 311-322.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.