nefrНефрологияNephrology (Saint-Petersburg)1561-62742541-9439Pavlov First Saint-Petersburg State Medical Universitynefr-59Research ArticleСтатьиЭКСПРЕССИЯ микроРНК-21 В МОЧЕ У ПАЦИЕНТОВ С НЕФРОПАТИЯМИURINARY microRNA-21 EXPRESSION IN NEPHROPATHIESСмирновА. В.SmirnovA. V.noemail@neicon.ruКаруннаяА. В.KarunnayaA. V.noemail@neicon.ruЗарайскийМ. И.ZarayskiM. I.noemail@neicon.ruСиповскийВ. Г.SipovskiV. G.noemail@neicon.ruКаюковИ. Г.KayukovI. G.noemail@neicon.ruХасунМ. .HasunM. .noemail@neicon.ruПарастаеваМ. М.ParastaevaM. M.noemail@neicon.ruЗверьковР. В.Zver'kovR. V.noemail@neicon.ruПервый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. ПавловаРоссияPavlov First Saint Petersburg State Medical UniversityRussian Federation2014011120141865963Copyright © Смирнов А.В., Карунная А.В., Зарайский М.И., Сиповский В.Г., Каюков И.Г., Хасун М..., Парастаева М.М., Зверьков Р.В., 20142014Смирнов А.В., Карунная А.В., Зарайский М.И., Сиповский В.Г., Каюков И.Г., Хасун М..., Парастаева М.М., Зверьков Р.В.Smirnov A.V., Karunnaya A.V., Zarayski M.I., Sipovski V.G., Kayukov I.G., Hasun M..., Parastaeva M.M., Zver'kov R.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.nephrolog.ru/jour/article/view/59

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Определить уровень экспрессии миРНК-21 в моче у пациентов с нефропатиями и сопоставить его с другими признаками поражения почек, в том числе морфологическими. ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ. В исследование включены 17 пациентов с нефропатиями, подтвержденными морфологически. У всех определены скорость клубочковой фильтрации, суточная протеинурия. Патоморфологические изменения в клубочках (глобальный, сегментарный склероз) оценены количественно; изменения в канальцах (атрофия) и интерстиции (фиброз) - полуколичественно (0 - нет изменений, 1 - до 25% в анализируемых срезах - изменения незначительно выражены, 2 - до 50% - изменения выражены умеренно, 3 - более 50 % анализируемого объекта - выраженное изменение). Экспрессия миРНК-21 в моче определялась при помощи реакции амплификации (RealTime PCR-протокол). Расчет проводился по методу 2-deltaCt. Результаты экспрессии миРНК-21 у больных сопоставлялись с данными, полученными при исследовании 10 здоровых лиц. РЕЗУЛЬТАТЫ. Уровень экспрессии миРНК-21 в моче у пациентов с нефропатиями значимо выше, чем у здоровых лиц (0,3070 [нижний - верхний квартили: 0,1540; 0,4060] и 0,001 [0,0002; 0,0254] соответственно, р=0,00024). Уровень экспрессии миРНК-21 в моче прямо коррелировал с выраженностью суточной протеинурии (Rs=0,570; р<0,05). При анализе морфологических изменений (гломерулярный, тубулоинтерстициальный склероз, атрофия канальцев) не выявлено корреляции с исследуемым уровнем экспрессии миРНК-21 в моче. При этом уровень экспрессии миРНК-21 в моче у пациентов с умеренно выраженной атрофией канальцев (0,354 [0,308; 0,933]; n=7) был значимо выше, чем с незначительными атрофическими изменениями (0,211 [0,033; 0,038]; n=10; р=0,04). ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Результаты работы свидельствуют о том, что уровень экспрессии миРНК-21 в моче может в определенной степени отражать тяжесть повреждения почек, в том числе выраженность морфологических изменений, однако необходимы дальнейшие исследования в этой области.

AIM OF RESEARH. Determine the level of expression of miR-21 in the urine of patients with nephropathy and to compare it with other signs of kidney damage, including morphological. PATIENTS AND METHODS. Seventeen patients with different nephropathy confirmed by kidney biopsy were examined. Glomerular filtration rate was assessed by creatinine clearance, CKD-EPI formula. Daily urinary protein has been established. The degree of glomerulosclerosis was evaluated quantitatively; tubular atrophy, tubulointerstitial fibrosis were evaluated semi-quantitatively on a scale from one to three (0 - no changes; 1 - minor changes, 1-25%; 2 - moderate changes, 25-50%; 3 - severe changes, >50%). miR-21 expression in the urine was determined by a RT-PCR assay and calculated using the 2-deilaCt protocol. miR-21 expression in the urine of healthy donors (n=10) was taken as control. RESULTS. The level of miR-21 expression in the urine in patients with nephropathy were significantly higher than in control (0,3070 [the lower and the upper quartiles: 0,1540; 0,4060] vs 0,001 [0,0002; 0,0254] respectively; P=0,00024). There was strong positive correlation between urinary miR-21 and daily urinary protein (Rs=0,570; P<0,05). There were no correlations between urinary miR-21 and morphological changes (glomerular, tubulointerstitial sclerosis, tubular atrophy). However, the level of expression of miRNA-21 in the urine of patients with moderate atrophy of tubules (0,354 [0,308; 0,933]; n=7) was significantly higher than with minor one (0,211 [0,033; 0,038]; n=10; P=0,04). CONCLUSION. These data suggest that the level of miR-21 expression in the urine to a certain degree can be associated with the severity of renal damage in patients with nephropathies, including the severity of morphological changes, but further research is needed in this area.

микроРНКмикроРНК-21тубулоинтерстициальный фиброзтрансформирующий фактор роста TGFβ1. ABSTRACTmicroRNAmicroRNA-21tubulointerstitial fibrosistransformation growth factor TGFβ1ReferencesKataoka M., Wang D.Z. Non-Coding RNAs Including miRNAs and lncRNAs in Cardiovascular Biology and Disease. Cells 2014 Aug 22; 3(3): 883-898.Kataoka M., Wang D.Z. Non-Coding RNAs Including miRNAs and lncRNAs in Cardiovascular Biology and Disease. Cells 2014 Aug 22; 3(3): 883-898.Condorelli G., Latronico M.V., Cavarretta E. microRNAs in cardiovascular diseases: current knowledge and the road ahead. J Am Coll Cardiol 2014 Jun 3; 63(21): 2177-2187.Condorelli G., Latronico M.V., Cavarretta E. microRNAs in cardiovascular diseases: current knowledge and the road ahead. J Am Coll Cardiol 2014 Jun 3; 63(21): 2177-2187.Gharipour M., Sadeghi M. Pivotal role of microRNA-33 in metabolic syndrome: A systematic review. ARYA Atheroscler 2013 Nov; 9(6): 372-376.Gharipour M., Sadeghi M. Pivotal role of microRNA-33 in metabolic syndrome: A systematic review. ARYA Atheroscler 2013 Nov; 9(6): 372-376.Rebane A., Akdis C.A. MicroRNAs in allergy and asthma. Curr Allergy Asthma Rep 2014 Apr; 14(4): 424.Rebane A., Akdis C.A. MicroRNAs in allergy and asthma. Curr Allergy Asthma Rep 2014 Apr; 14(4): 424.Hartl M., Grunwald Kadow IC. New roles for „old“ microRNAs in nervous system function and disease. Front Mol Neurosci 2013 Dec 24; 6: 51.Hartl M., Grunwald Kadow IC. New roles for „old“ microRNAs in nervous system function and disease. Front Mol Neurosci 2013 Dec 24; 6: 51.Finch M.L., Marquardt J.U., Yeoh G.C., Callus B.A. Regulation of microRNAs and their role in liver development, regeneration and disease. Int J Biochem Cell Biol 2014 Sep; 54C: 288-303.Finch M.L., Marquardt J.U., Yeoh G.C., Callus B.A. Regulation of microRNAs and their role in liver development, regeneration and disease. Int J Biochem Cell Biol 2014 Sep; 54C: 288-303.Tanase C.P., Neagu A.I., Necula L.G. et al. Cancer stem cells: Involvement in pancreatic cancer pathogenesis and perspectives on cancer therapeutics. World J Gastroenterol 2014 Aug 21; 20(31): 10790-10801.Tanase C.P., Neagu A.I., Necula L.G. et al. Cancer stem cells: Involvement in pancreatic cancer pathogenesis and perspectives on cancer therapeutics. World J Gastroenterol 2014 Aug 21; 20(31): 10790-10801.Смирнов А.В., Кучер А.Г., Добронравов В.А. и др. Диетарный соевый протеин замедляет развитие интерстициального почечного фиброза у крыс с односторонней обструкцией мочеточника: введение в нутритивную эпигеномику. Нефрология 2012; 16(4): 75-83Смирнов А.В., Кучер А.Г., Добронравов В.А. и др. Диетарный соевый протеин замедляет развитие интерстициального почечного фиброза у крыс с односторонней обструкцией мочеточника: введение в нутритивную эпигеномику. Нефрология 2012; 16(4): 75-83Смирнов А.В., Кучер А.Г., Добронравов В.А. и др. Диетарный соевый протеин замедляет развитие интерстициального почечного фиброза у крыс с односторонней обструкцией мочеточника: введение в нутритивную эпигеномику. Нефрология 2012; 16(4): 75-83].Смирнов А.В., Кучер А.Г., Добронравов В.А. и др. Диетарный соевый протеин замедляет развитие интерстициального почечного фиброза у крыс с односторонней обструкцией мочеточника: введение в нутритивную эпигеномику. Нефрология 2012; 16(4): 75-83].Adams B.D., Kasinski A.L., Slack F.J. Aberrant Regulation and Function of MicroRNAs in Cancer. Curr Biol 2014 Aug 18; 24(16): R762-R776.Adams B.D., Kasinski A.L., Slack F.J. Aberrant Regulation and Function of MicroRNAs in Cancer. Curr Biol 2014 Aug 18; 24(16): R762-R776.Qingqing W., Qing-Sheng M., Zheng D. The regulation and function of microRNAs in kidney diseases. IUBMB Life 2013 July; 65(7): 602-614.Qingqing W., Qing-Sheng M., Zheng D. The regulation and function of microRNAs in kidney diseases. IUBMB Life 2013 July; 65(7): 602-614.Kozomara A., Griffiths-Jones S. miRBase: integrating microRNA annotation and deep-sequencing data. Nucleic Acids Res 2011; 39: D152-157.Kozomara A., Griffiths-Jones S. miRBase: integrating microRNA annotation and deep-sequencing data. Nucleic Acids Res 2011; 39: D152-157.Landgraf P., Rusu M., Sheridan R et al. A mammalian microRNA expression atlas based on small RNA library sequencing. Cell 2007; 129(7): 1401-1414.Landgraf P., Rusu M., Sheridan R et al. A mammalian microRNA expression atlas based on small RNA library sequencing. Cell 2007; 129(7): 1401-1414.Sun X., Koo S., White N. et al. Development of a micro-array to detect human and mouse microRNAs and characterization of expression in human organs. Nucleic Acids Res 2004; 32(22): e188.Sun X., Koo S., White N. et al. Development of a micro-array to detect human and mouse microRNAs and characterization of expression in human organs. Nucleic Acids Res 2004; 32(22): e188.Chandrasekaran K., Karolina D.S., Sepramaniam S. et al. Role of microRNAs in kidney homeostasis and disease. Kidney Int 2012; 81(7): 617-627.Chandrasekaran K., Karolina D.S., Sepramaniam S. et al. Role of microRNAs in kidney homeostasis and disease. Kidney Int 2012; 81(7): 617-627.Lan H.Y. Diverse Roles of TGF-β/Smads in Renal Fibrosis and Inflammation. Int J Biol Sci 2011; 7(7): 1056-1067.Lan H.Y. Diverse Roles of TGF-β/Smads in Renal Fibrosis and Inflammation. Int J Biol Sci 2011; 7(7): 1056-1067.Kumarswamy R., Volkmann I., Thum T. Regulation and function of miRNA-21 in health and disease. RNA Biol 2011 Sep-Oct; 8(5): 706-713.Kumarswamy R., Volkmann I., Thum T. Regulation and function of miRNA-21 in health and disease. RNA Biol 2011 Sep-Oct; 8(5): 706-713.Duffield J.S., Grafals M., Portilla D. MicroRNAs are potential therapeutic targets in fibrosing kidney disease: lessons from animal models. Drug DiscovToday Dis Models 2013 Fall; 10(3): e127-e135.Duffield J.S., Grafals M., Portilla D. MicroRNAs are potential therapeutic targets in fibrosing kidney disease: lessons from animal models. Drug DiscovToday Dis Models 2013 Fall; 10(3): e127-e135.Patel V., Noureddine L. MicroRNAs and fibrosis. Curr Opin Nephrol Hypertens Jul 2012; 21(4): 410-416.Patel V., Noureddine L. MicroRNAs and fibrosis. Curr Opin Nephrol Hypertens Jul 2012; 21(4): 410-416.Zarjou A., Yang S., Abraham E., Agarwal A. et al. Identification of a microRNA signature in renal fibrosis: role of miR-21. Am J Physiol Renal Physiol Oct 2011; 301(4): F793-F801.Zarjou A., Yang S., Abraham E., Agarwal A. et al. Identification of a microRNA signature in renal fibrosis: role of miR-21. Am J Physiol Renal Physiol Oct 2011; 301(4): F793-F801.D’Alessandra X., Devanna P., Limana F. et al. Circulating microRNAs are new and sensitive biomarkers of myocardial infarction. Eur Heart J 2010 November; 31(22): 2765-2773.D’Alessandra X., Devanna P., Limana F. et al. Circulating microRNAs are new and sensitive biomarkers of myocardial infarction. Eur Heart J 2010 November; 31(22): 2765-2773.Shi B., Guo Y., Wang J., Gao W. Altered expression of microRNAs in the myocardium of rats with acute myocardial infarction. BMC Cardiovasc Disord 2010; 10: 11.Shi B., Guo Y., Wang J., Gao W. Altered expression of microRNAs in the myocardium of rats with acute myocardial infarction. BMC Cardiovasc Disord 2010; 10: 11.Godwin J.G., Ge X., Stephan K. et al. Identification of a microRNA signature of renal ischemia-reperfusion injury. Proc Natl Acad Sci USA 2010; 107: 14339-14344.Godwin J.G., Ge X., Stephan K. et al. Identification of a microRNA signature of renal ischemia-reperfusion injury. Proc Natl Acad Sci USA 2010; 107: 14339-14344.Thum T., Gross C., Fiedler J. et al. MicroRNA-21 contributes to myocardial disease by stimulating MAP kinase signalling in fibroblasts. Nature 2008; 456: 980-984.Thum T., Gross C., Fiedler J. et al. MicroRNA-21 contributes to myocardial disease by stimulating MAP kinase signalling in fibroblasts. Nature 2008; 456: 980-984.Liu G., Friggeri A.,Yang Y. et al. miR-21 mediates fibrogenic activation of pulmonary fibroblasts and lung fibrosis. J Exp Med 2010; 207: 1589-1597.Liu G., Friggeri A.,Yang Y. et al. miR-21 mediates fibrogenic activation of pulmonary fibroblasts and lung fibrosis. J Exp Med 2010; 207: 1589-1597.Zhong X., Chung A.C., Chen H.Y. et al. Smad3-mediated upregulation of miR-21 promotes renal fibrosis. J Am Soc Nephrol 2011; 22: 1668-1681.Zhong X., Chung A.C., Chen H.Y. et al. Smad3-mediated upregulation of miR-21 promotes renal fibrosis. J Am Soc Nephrol 2011; 22: 1668-1681.Bottinger E.P. TGF-beta in renal injury and disease. Semin Nephrol 2007; 27: 309-320.Bottinger E.P. TGF-beta in renal injury and disease. Semin Nephrol 2007; 27: 309-320.Wang W., Koka V., Lan H.Y. Transforming growth factor-beta and Smad signalling in kidney diseases. Nephrology (Carlton) 2005; 10(1): 48-56.Wang W., Koka V., Lan H.Y. Transforming growth factor-beta and Smad signalling in kidney diseases. Nephrology (Carlton) 2005; 10(1): 48-56.Davis B.N., Hilyard A.C., Lagna G., Hata A. SMAD proteins control DROSHA-mediated microRNA maturation. Nature 2008; 454: 56-61.Davis B.N., Hilyard A.C., Lagna G., Hata A. SMAD proteins control DROSHA-mediated microRNA maturation. Nature 2008; 454: 56-61.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.