ЦИРКУЛИРУЮЩИЕ РЕГУЛЯТОРНЫЕ CD4+CD25+HIGHFOXP3+ Т-КЛЕТОК У РЕЦИПИЕНТОВ ПОЧЕЧНОГО ТРАНСПЛАНТАТА (ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЕ СООБЩЕНИЕ)

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Регуляторные Т-клетки (РТК) являются одним из механизмов развития и поддержания иммунной толерантности. Целью данного исследование была оценка содержания циркулирующих РТК, экспрессирующих маркеры CD4, CD25 и Foxp3, у больных с функционирующим почечным трансплантатом (ПТ). ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ. В обсервационное исследование были включены 30 стабильных реципиентов c ПТ со сроками посттрансплантационного наблюдения от 6 до 24 мес., в среднем 353 дня (95% ДИ 246–459), 7 больных через 1–3 мес. после трансплантации почки (ТП) и 5 здоровых лиц. Все больные получили индукцию анти-CD25 моноклональными антителами (анти-CD25МАb –базиликсимабом). Исследование экспрессии CD4, CD25 и FoxP3 в лимфоцитах периферической крови проводили методом проточной цитометрии. РЕЗУЛЬТАТЫ. Доля CD4+CD25 + high FOXP3+ от общего количества CD4+ клеток варьировала в достаточно широких пределах и была, в среднем, существенно ниже, чем у здоровых лиц. Общая экспрессия FoxP3 в лимфоцитах имела высоко достоверную положительную связь с содержанием CD4+FoxP3+ клеток. Корреляция выявлена между абсолютным количеством клеток, несущих маркер FoxP3, и РТК с фенотипом СD4+СD25+ high FoxP3+ (rpearson=0,86; p<0,001). В среднем РТК составляли 55% (95% ДИ 43–68) от абсолютного количества клеток, экспрессирующих FoxP3. Также отчетливая положительная взаимосвязь была обнаружена между общей экспрессией FoxP3+ в СD4+-лимфоцитах и РТК с фенотипом СD4+СD25+ highFoxP3+ (rpearson=0,95; p<0,001). Вместе с тем, не выявлено корреляции между содержанием СD4+СD25+ клеток и РТК (rpearson=–0,08; p=0,68). Соотношение РТК и всех клеток, экспрессирующих FoxP3 имело отчетливую тенденцию к росту по мере увеличения длительности периода после ТП (rpearson=0,42; p=0,024).У больных, обследованных в течение 1–3 мес. после трансплантации базиликсимаба, содержание CD25 на лимфоцитах и клеток с тройной меткой (СD4+СD25+ high FoxP3+) было крайне низким, приближаясь к нулю. В то же время, экспрессия CD4 и FoxP3 у этих больных сохранялась достаточно высокой, достоверно не отличаясь у больных, обследованных в более поздние сроки после операции. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Полученные данные косвенно свидетельствуют о том, что пул РТК после трансплантации почки, в значительной степени, определяется способностью лимфоцитов к экспрессии FoxP3. Причины обнаруженного снижения содержания РТК в циркуляции реципиентов ПТ, в частности, роль анти-CD25МАb, требуют проведения дальнейших исследований.

1. Lamb KE, Lodhi S, Meier-Kriesche HU. Long-term renal allograft survival in the United States: a critical reappraisal. Am J Transplan 2011;11(3):450-462

2. Pascual M, Theruvath T, Kawai T. et al. Strategies to improve long-term outcomes after renal transplantation. N Engl J Med 2002; 346(8):580-590

3. Paul LC. Chronic allograft nephropathy: An update. Kidney Int 1999;56(3):783-793

4. Gershon RK, Kondo K. Cell interactions in the induction of tolerance: the role of thymic lymphocytes. Immunology 1970;18(5):723-737

5. Moller G. Do suppressor T cells exist? Scandinavian Journal of Immunology 1988; 27(3):247–250

6. Green DR, Webb DR. Saying the ’S’ word in public. Immunology Today 1993; 14(11):523–525

7. Sakaguchi S, Sakaguchi N, Asano M. et al. Immunologic self-tolerance maintained by activated T cells expressing IL- 2 receptor α-chains (CD25): breakdown of a single mechanism of self- tolerance causes various autoimmune diseases. Journal of Immunology 1995; 155(3):1151–1164

8. Sakaguchi S, N. Sakaguchi J. Shimizu S. et al. Immunologic tolerance maintained by CD25+ CD4+ regulatory T cells: their common role in controlling autoimmunity, tumor immunity, and transplantation tolerance. Immunol Rev 2001; 182:18–32

9. Fontenot JD, Gavin MA, Rudensky AY. Foxp3 programs the development and function of CD4+CD25+ regulatory T cells. Nature Immunology 2003;4(4):330–336

10. Hori S, Nomura T, Sakaguchi S. Control of regulatory T cell development by the transcription factor Foxp3. Science 2003; 299(5609):1057–1061

11. Benghiat FS, Graca L, Braun MY. et al. Critical influence of natural regulatory CD25+ T cells on the fate of allografts in the absence of immunosuppression. Transplantation 2005;79(6):648– 654

12. Zheng XX, Sanchez-Fueyo A, Domenig C, Strom TB. The balance of deletion and regulation in allograft tolerance. Immunological Reviews 2003;196:75–84

13. Joffre O, Santolaria T, Calise D. et al. Prevention of acute and chronic allograft rejection with CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T lymphocytes. Nature Medicine 2008; 14(1):88–92

14. Muller YD, Golshayan D, Ehirchiou D, et al. Immunosuppressive effects of streptozotocin-induced diabetes result in absolute lymphopenia and a relative increase of T regulatory cells. Diabetes 2011;60:2331–2340

15. Graca L, Cobbold SP, Waldmann H. Identification of regulatory T cells in tolerated allografts. Journal of Experimental Medicine 2002; 195(12):1641–1646

16. Wood KJ, Sakaguchi S. Regulatory T cells in transplantation tolerance. Nature Reviews Immunology 2003; 3(3):199–210

17. Curotto de Lafaille MA, Lafaille JJ. Natural and adaptive Foxp3+ regulatory T cells: more of the same or a division of labor? Immunity 2009; 30(5):626–635

18. Liu Y, Zhang P, Li J. et al. A critical function for TGF-β signaling in the development of natural CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T cells. Nature Immunology 2008; 9(6): 632–640

19. Molinero LL, Yang J, Gajewski T. et al. CARMA1 controls an early checkpoint in the thymic development of foxP3+ regulatory T cells. Journal of Immunology 2009; 182(11):6736–6743

20. Jonuleit H, Schmitt E, Stassen M. et al. Identification and functional characterization of human CD4+CD25+ T cells with regulatory properties isolated from peripheral blood. Journal of Experimental Medicine 2001;193(11):1285–1294

21. Chen W, Jin W, Hardegen N. et al. Conversion of peripheral CD4+CD25− naive T cells to CD4+CD25+ regulatory T cells by TGF-β induction of transcription factor Foxp3. Journal of Experimental Medicine 2003;198(12): 1875–1886

22. McHugh RS, Whitters MJ, Piccirillo CA. et al. CD4+CD25+ immunoregulatory T cells: gene expression analysis reveals a functional role for the glucocorticoid-induced TNF receptor. Immunity 2002; 16(2): 311–323

23. Shimizu J, Yamazaki S, Takahashi T. et al. Stimulation of CD25+CD4+ regulatory T cells through GITR breaks immunological self-tolerance. Nature Immunology 2002; 3(2):135–142

24. Read S, Malmström V, Powrie F. Cytotoxic T lymphocyteassociated antigen 4 plays an essential role in the function of CD25+CD4+ regulatory cells that control intestinal inflammation. Journal of Experimental Medicine 2000;192(2): 295–302

25. Allakhverdi Z, Fitzpatrick D, Boisvert A, et al. Expression of CD103 identifies human regulatory T-cell subsets. Journal of Allergy and Clinical Immunology 2006;118(6): 1342–1349

26. Fontenot JD, Gavin MA, Rudensky AY. Foxp3 programs the development and function of CD4+CD25+ regulatory T cells. Nature Immunology 2003; 4(4): 330–336

27. Hori S, Nomura T, Sakaguchi S. Control of regulatory T cell development by the transcription factor Foxp3. Science 2003; 299(5609): 1057–1061

28. Khattri R, Cox T, Yasayko SA, Ramsdell F. An essential role for Scurfin in CD4+CD25+ T regulatory cells. Nature Immunology 2003; 4(4):337–342

29. Miyara M, Yoshioka Y, Kitoh A. et al. Functional delineation and differentiation dynamics of human CD4+ T cells expressing the FoxP3 transcription factor. Immunity 2009;30(6):899–911

30. Lohr J, Knoechel B, Abbas AK. Regulatory T cells in the periphery. Immunol Rev 2006; 212:149–162

31. Tang Q, Henriksen KJ, Boden EK. et al. Cutting edge: CD28 controls peripheral homeostasis of CD4+CD25+ regulatory T cells. J Immunol 2003; 171:3348–3352

32. Bluestone JA, Liu W, Yabu JM. et al. The effect of costimulatory and interleukin 2 receptor blockade on regulatory T cells in renal transplantation. Am J Transplant 2008; 8(10): 2086-2096

33. Vondran FW, Timrott K, Tross J et al. Impact of basiliximab on regulatory T-cells early after kidney transplantation: downregulation of CD25 by receptor modulation. Transplant Int 2010; 23(5): 514–523