Перейти к:
ВЗАИМОСВЯЗЬ АЛЛЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНОВ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА НА РАЗВИТИЕ И ТЕЧЕНИЕ ВОЛЧАНОЧНОГО НЕФРИТА
https://doi.org/10.24884/1561-6274-2019-23-2-77-81
Аннотация
ЦЕЛЬ: оценка влияния аллельных вариаций генов системы гемостаза на развитие и течение волчаночного нефрита. ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ: обследовали 100 пациентов с СКВ европеоидной расы, 80 женщин и 20 мужчин в возрасте от 16 до 73 лет (средний возраст 37±14 лет). Длительность наблюдения составляла для 73 больных более 5 лет, для 18 – от 1 года до 5 лет и для 9 – менее 1 года. Повышение уровня креатинина в крови выше или равное 2 мг/дл считалось значимым признаком нарушения функции почек. РЕЗУЛЬТАТЫ. Среди пациентов, включенных в исследование, поражение почек выявлено у 61 человека (61%). У 33 из них (54,1%) – по типу быстропрогрессирующего волчаночного нефрита (БПВН). У больных с ВН статистически значимо чаще встречались мутации в гене MTHFR (C677T) (p=0,033). ОШ для мутантного генотипа – 6.1 (95% ДИ 1,6 – 22,3). У больных с БПВН статистически значимо чаще встречались мутации в гене MTHFR (C677T) (p=0,031). ОШ для мутантного генотипа – 1.6 при (95% ДИ 1,0 – 4,7). Пятилетняя «почечная» выживаемость у носителей мутантного аллеля гена MTHFR (C677T) статистически значимо меньше (72,8%), чем у пациентов без данной мутации (81,9%) (р=0,027). Десятилетняя «почечная» выживаемость у носителей мутантного аллеля гена MTHFR (C677T) статистически значимо меньше (55,6%), чем у пациентов без данной мутации (70,5%) (р=0,016). У больных с ВН статистически значимо чаще встречались мутации в гене PAI-1 (4G/5G 675) (p=0,046). ОШ для мутантного генотипа – 1.7 (95% ДИ 1.0 – 4.7). ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Мутантные аллели генов MTHFR (C677T) и PAI-1 (4G/5G 675), вероятно, ассоциированы с развитием ВН. Полиморфизм гена MTHFR (C677T) связан с неблагоприятным течением ВН.
Для цитирования:
Борисов Е.Н., Иваницкий Л.В., Самоходская Л.М., Краснова Т.Н., Павликова Е.П., Камалов А.А. ВЗАИМОСВЯЗЬ АЛЛЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНОВ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА НА РАЗВИТИЕ И ТЕЧЕНИЕ ВОЛЧАНОЧНОГО НЕФРИТА. Нефрология. 2019;23(2):77-81. https://doi.org/10.24884/1561-6274-2019-23-2-77-81
For citation:
Borisov E.N., Ivanitsky L.V., Samokhodskaya L.M., Krasnova T.N., Pavlikova E.P., Kamalov A.A. INTERRELATION OF ALLELIC VARIANTS OF HEMOSTASIS SYSTEM GENES ON THE DEVELOPMENT AND COURSE OF LUPUS NEPHRITIS. Nephrology (Saint-Petersburg). 2019;23(2):77-81. (In Russ.) https://doi.org/10.24884/1561-6274-2019-23-2-77-81
ВВЕДЕНИЕ
Волчаночный нефрит (BH) - один из наиболее тяжелых висцеритов при системной красной волчанке (СКВ). Клинические и лабораторные признаки патологии почек наблюдаются у 50-70 % пациентов. [1]. Тромботическая микроангиопатия (ТМА) у таких больных вносит дополнительный вклад в поражение почек, ухудшает прогноз течения заболевания и снижает общую выживаемость. Своевременная диагностика нарушений свёртывающей системы крови, присоединение к терапии антикоагулянтов улучшат исходы среди пациентов с BH, которые имеют ТМА [2].
Известно, что риск развития тромботических осложнений увеличивается при наличии дефектов в генах, влияющих на систему гемостаза. В развитии и течении нефрита в рамках СКВ идентифицировано множество потенциальных генетических предикторов, однако, в настоящее время нет полного понимания ассоциации распределения аллелей риска и клинических проявлений заболевания. [3]
Цель: оценка влияния аллельных вариаций генов системы гемостаза на развитие и течение вол- чаночного нефрита.
ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ
В исследование включены 100 пациентов с СКВ европеоидной расы. Все больные проходили комплексное клинико-лабораторное обследование в клинике нефрологии, внутренних и профессиональных болезней им. Е.М. Тареева Первого МГМУ им. И.М. Сеченова. Половозрастная структура: 80 женщин и 20 мужчин в возрасте от 16 до 73 лет (средний возраст 37±14 лет). Длительность наблюдения составляла для 73 больных более 5 лет, для 18 - от 1 года до 5 лет и для 9 - менее 1 года. Повышение уровня креатинина в крови выше или равное 2 мг/дл считалось значимым признаком нарушения экскреторной функции почек. Больные с BH получали сочетанную иммуносупрессивную терапию преднизолоном и циклофосфаном или препаратами микофеноло- вой кислоты, в том числе в сверхвысоких дозах. Исследование полиморфизма генов проводили в лаборатории генных и клеточных технологий кафедры биохимии и молекулярной медицины факультета фундаментальной медицины МГУ им. М.В. Ломоносова с помощью аллельспеци- фичной полимеразной цепной реакции и электрофореза в агарозном геле.
Статистический анализ полученных данных проводили с использованием общепринятых параметрических и непараметрических методов. Применяли стандартные методы описательной статистики. Центральные тенденции при нормальном распределении признака оценивали по величине средних значений и среднеквадратического отклонения (Μ±σ); при асимметричном - по медиане и доверительному интервалу (ДИ). Статистическую значимость межгрупповых различий количественных переменных определяли с помощью дисперсионного анализа (ANOVA), критерии Манна - Уитни или Уилкоксона, бинарных переменных - с помощью х2-критерия. Отношение шансов (ОШ) рассчитывали в ходе логистического регрессионного анализа. Оценку «почечной» выживаемости (ПВ) проводили методом Каплана-Мейера. Нулевую гипотезу (ошибка первого рода) отвергали при p<0,05. Для расчетов использовали пакет прикладных статистических программ «Statistica Ver. 12.0» («StatSoft, Inc.», США).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Среди пациентов, включенных в исследование, поражение почек выявлено у 61 человека (61 %). У 33 из них (54,1 %) наблюдался вариант почечной патологии по типу быстропрогрессирующего волчаночного нефрита (БПВН). У пациентов с медленнопрогрессирующим течением поражения почек (20 человек - 32.7 %) ведущим в клинической картине заболевания был нефротический синдром (НС) (13 пациентов - 65 %), у 7 пациентов (35 %) - мочевой синдром. У 8 пациентов (13,2 %) поражение почек протекало латентно.
У больных с ВН статистически значимо чаще встречались мутации в гене MTHFR (C677T) (p=0,033). Стандартная ошибка доли мутантного генотипа (ММ - 34,4 %) составила 9,2 %, ОШ для мутантного генотипа - 6,1 (95 % ДИ 1,6 - 22,3 (табл. 1).
У больных с БПВН статистически значимо чаще встречались мутации в гене MTHFR (C677T) (p=0,031). Стандартная ошибка доли мутантного генотипа (ММ - 39,8 %) составила 9,8 %, ОШ для мутантного генотипа - 1,6 (95 % ДИ от 1,0 - 4,7), табл. 2.
Таблица 1 / Table 1
Полиморфизм аллелей и генотипов гена белка MTHFR (C677T) у больных с ВН и без него
Polymorphism of alleles and genotypes of the MTHFR protein gene (C677T) in patients with and without BH
Клинический признак | N | M | NN | NM | MM | Всего пациентов |
---|---|---|---|---|---|---|
СКВ с нефритом | 42,3 % | 57,7 % | 21,3 % (13) | 44,3 % (27) | 34,4 % (21) | 61 |
СКВ без нефрита | 67,6 % | 32,4 % | 48,7 % (19) | 43,6 % (17) | 7,7 % (3) | 39 |
p | p=0,028 | p=0,033 |
|
Примечание. Здесь и в табл. 2-3: N - мажорный аллель; M - минорный аллель.
Таблица 2 / Table 2
Полиморфизм аллелей и генотипов гена белка MTHFR (C677T) у больных с БПВН и с другими вариантами нефрита
Polymorphism of alleles and genotypes of the MTHFR gene (C677T) in patients with BPVN and with other nephritis variants
Клинический признак | N | M | NN | NM | MM | Всего пациентов |
---|---|---|---|---|---|---|
БПВН | 35,4 % | 64,6 % | 18,9 % (6) | 41,3 % (14) | 39,8 % (13) | 33 |
Другие варианты ВН | 72,1 % | 27,9 % | 32,1 % (9) | 39,3 % (11) | 28,6 % (8) | 28 |
p | p=0,039 | p=0,046 |
|
Таблица 3 / Table 3
Полиморфизм аллелей и генотипов гена белка PAI-1 (4G/5G 675) у больных с ВН и без него
Polymorphism of alleles and genotypes of the PAI-1 protein gene (4G / 5G 675) in patients with and without lupus nephritis
Клинический признак | N | M | NN | NM | MM | Всего пациентов |
---|---|---|---|---|---|---|
СКВ с нефритом | 54,8 % | 45,2 % | 24,6 % (15) | 47,5 % (29) | 27,9 % (17) | 61 |
СКВ без нефрита | 60,1 % | 39,9 % | 35,9 % (14) | 46,2 % (18) | 17,9 % (7) | 39 |
p | p=0,045 | p=0,048 |
|
Под «почечной» выживаемостью (ПВ) понимали долю больных, у которых произошло снижение экскреторной функции почек (повышение уровня креатинина в крови более 2 мг/дл). Пятилетняя «почечная» выживаемость у носителей мутантного аллеля гена MTHFR (C677T) статистически значимо меньше, чем у пациентов без данной мутации 72,8 (95 % ДИ от 62,6 - 75,3 %) и 81,9 % (95 % ДИ 78,1 - 86,7 %) соответственно, р=0,027.
Десятилетняя «почечная» выживаемость у носителей мутантного аллеля гена MTHFR (C677T) статистически значимо меньше, чем у пациентов без данной мутации 55,6 (95 % ДИ 42,5 - 65,1 %) и 70,5 % (95 % ДИ 65,9 - 79,7 %) соответственно, р=0,016 (рисунок).
У пациентов с ВН при наличии мутантного аллеля MTHFR (C677T) отмечался больший уровень протеинурии в рамках НС (в среднем 6,8 ± 1,2 г/л) по сравнению с таковым у пациентов без мутантного аллеля данного гена (средняя протеи- нурия 2,4 ± 0.5 г/л ), p=0,037.
У больных с ВН статистически значимо чаще встречались мутации в гене PAI-1 (4G/5G 675), p=0,046. Стандартная ошибка доли мутантного генотипа (ММ - 28,1 %) составила 6,5 %, ОШ для мутантного генотипа - 1,7 при (95 % ДИ 1,0 - 4,7), табл. 3.
Связь полиморфизма PAI-1 (4G/5G 675) с вариантом течения ВН и «почечной» выживаемостью статистически недостоверна.
Не выявлено ассоциации с развитием и течением ВН с полиморфизмом генов фактора XIII - FXIII (G485T), гликопротеина Ia - GPIa (C807T) и гликопротеина IIIa - GPIIIa (T196C), субъединицы p22phox NADH-оксидазы - p22phox (C242T), эндотелиальной NO-синтазы - eNOS (G894T).
Рисунок. Почечная выживаемость у больных с СКВ в зависимости от наличия мутантного аллеля гена MTHFR (C677T).
Figure. Renal survival in patients with SLE, depending on the presence of the mutant allele of the MTHFR gene (C677T).
ОБСУЖДЕНИЕ
При наличии минорного аллеля MTHFR (C677T) повышается риск развития ТМА, в том числе приводящей к поражению клубочкового аппарата почек.
Сочетание иммунокомплексного поражения и ТМА ведет к повышенному риску развития нефрита и его тяжелому течению у больных с СКВ.
Описан частый полиморфизм, заключающийся в замене цитозина на тимин в 677-м положении гена (C677T), кодирующего MTHFR, фермент участвующий в метаболизме гомоцистеина.
В результате происходит замена Glu на Ala в первичной структуре белка, что, в свою очередь, приводит к образованию термолабильного и менее активного варианта фермента. Это ведет к уменьшению образования 5-метилтетрагидрофолата и, соответственно, метионина из гомоцистеина и накоплению последнего. Нарушение метаболизма гомоцистеина вследствие мутации в гене MTHFR (C677T) является фактором риска тромботических осложнений [4].
Протромботический эффект при этом обусловлен поражением эндотелия сосудистого русла. Обнажается субэндотелиальный матрикс, изменяется активность эндотелиальной NO-синтазы (eNOS), изменяется пролиферация гладкомышечных клеток, что приводит к активации тромбоцитов, фактора XII и фактора V Все это способствует реакции трасформации протромбина в тромбин [5].
Ингибитор активатора плазмино- гена-1 (PAI-1) является ингибитором фибринолиза и участвует в отложении фибрина в почечных клубочках. Инсерционно-делеционный 4G/5G полиморфизм (rs 1799889(-)): выпадение одного из пяти гуаниновых нуклеотидов в (-675) позиции промоторной области. Аллель 5G имеет меньшую транскрипционную активность, наличие мутантной аллели 4G приводит к повышению активности PAI-1 и склонности к тромбозам. По результатам недавнего мета-анализа показано, что пациенты с аллелью 4G имеют большие шансы тромботических осложнений, чем пациенты с генотипом 5G/5G [6]. Поскольку активация передачи сигналов гломерулярного Toll-подобного рецептора 3 (TLR3), по сообщениям, играет ключевую роль в патогенезе волчаночного нефрита (LN). TLR3-опосредованная экспрессия PAI-1 в гломерулярных эндотелиальных клетках человека может влиять на развитие ВН [7, 8]. Таким образом, полиморфизм PAI-1 (4G/5G 675), вероятно, ассоциирован с повышенным риском развития ВН.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Мутантные аллели генов MTHFR (C677T) и PAI-1 (4G/5G 675), вероятно, связаны с развитием BH. Полиморфизм гена MTHFR (C677T) обуславливает неблагоприятное течение BH. Определение наследственных факторов риска развития нефрита в рамках СКВ позволит своевременно диагностировать и начинать лечение, используя подходы персонифицированной медицины.
Список литературы
1. Краснова ТН. Поражение почек при системной красной волчанке: современные представления о патогенезе, клинике, подходы к лечению. Современная ревматология 2008;2(3):18– 21. https://Doi.org/10.14412/1996- 7012-2008-483
2. Turrent-Carriles A, Herrera-Félix JP, Amigo MC. Renal Involvement in Antiphospholipid Syndrome. Front Immunol 2018; 9:1008. Doi: 10.3389/fimmu.2018.01008
3. Flores-Mendoza G, Sansón SP, Rodríguez-Castro S et al. Mechanisms of Tissue Injury in Lupus Nephritis. Trends Mol Med 2018;24(4):364–378. Doi: 10.1016/j.molmed.2018.02.003
4. Santilli F, Davì G, Patrono C. Homocysteine, methylene tetrahydrofolate reductase, folate status and atherothrombosis: A mechanistic and clinical perspective. Vascul Pharmacol 2016;78:1–9. Doi: 10.1016/j.vph.2015.06.009
5. Yuyun MF, Ng LL, Ng GA. Endothelial dysfunction, endothelial nitric oxide bioavailability, tetrahydrobiopterin, and 5-methyltetrahydrofolate in cardiovascular disease. Where are we with therapy? Microvasc Res 2018;119:7–12. Doi: 10.1016/j. mvr.2018.03.012
6. Liu Y, Cheng J, Guo X et al. The roles of PAI-1 gene polymorphisms in atherosclerotic diseases: A systematic review and metaanalysis involving 149,908 subjects. Gene 2018;673:167–173. Doi: 10.1016/j.gene.2018.06.040
7. Hamano K, Iwano M, Akai Y et al. Expression of glomerular plasminogen activator inhibitor type 1 in glomerulonephritis. Am J Kidney Dis 2002;39:695–705. Doi: 10.1053/ajkd.2002.31986
8. Liu Q, Imaizumi T, Kawaguchi S et al. Toll-like receptor 3 signaling contributes to regional neutrophil recruitment in cultured human glomerular endothelial cells. Nephron 2018;139:349–358
Об авторах
Е. Н. БорисовРоссия
врач-терапевт
Л. В. Иваницкий
Россия
доц., кафедра общей врачебной практики (семейная медицина)
Л. М. Самоходская
Россия
доц., лаборатория генных и клеточных технологий кафедры биохимии и молекулярной медицины факультета фундаментальной медицины, зав. лабораторией
Т. Н. Краснова
Россия
доц., факультет фундаментальной медицины, кафедра внутренних болезней
Е. П. Павликова
Россия
Проф., заведующая отделом внутренних болезней
А. А. Камалов
Россия
Проф., директор Медицинского научно-образовательного центра, академик РАН.
Рецензия
Для цитирования:
Борисов Е.Н., Иваницкий Л.В., Самоходская Л.М., Краснова Т.Н., Павликова Е.П., Камалов А.А. ВЗАИМОСВЯЗЬ АЛЛЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНОВ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА НА РАЗВИТИЕ И ТЕЧЕНИЕ ВОЛЧАНОЧНОГО НЕФРИТА. Нефрология. 2019;23(2):77-81. https://doi.org/10.24884/1561-6274-2019-23-2-77-81
For citation:
Borisov E.N., Ivanitsky L.V., Samokhodskaya L.M., Krasnova T.N., Pavlikova E.P., Kamalov A.A. INTERRELATION OF ALLELIC VARIANTS OF HEMOSTASIS SYSTEM GENES ON THE DEVELOPMENT AND COURSE OF LUPUS NEPHRITIS. Nephrology (Saint-Petersburg). 2019;23(2):77-81. (In Russ.) https://doi.org/10.24884/1561-6274-2019-23-2-77-81