Preview

Нефрология

Расширенный поиск

ВЗАИМОСВЯЗЬ АЛЛЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНОВ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА НА РАЗВИТИЕ И ТЕЧЕНИЕ ВОЛЧАНОЧНОГО НЕФРИТА

https://doi.org/10.24884/1561-6274-2019-23-2-77-81

Полный текст:

Аннотация

ЦЕЛЬ: оценка влияния аллельных вариаций генов системы гемостаза на развитие и течение волчаночного нефрита. ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ: обследовали 100 пациентов с СКВ европеоидной расы, 80 женщин и 20 мужчин в возрасте от 16 до 73 лет (средний возраст 37±14 лет). Длительность наблюдения составляла для 73 больных более 5 лет, для 18 – от 1 года до 5 лет и для 9 – менее 1 года. Повышение уровня креатинина в крови выше или равное 2 мг/дл считалось значимым признаком нарушения функции почек. РЕЗУЛЬТАТЫ. Среди пациентов, включенных в исследование, поражение почек выявлено у 61 человека (61%). У 33 из них (54,1%) – по типу быстропрогрессирующего волчаночного нефрита (БПВН). У больных с ВН статистически значимо чаще встречались мутации в гене MTHFR (C677T) (p=0,033). ОШ для мутантного генотипа – 6.1 (95% ДИ 1,6 – 22,3). У больных с БПВН статистически значимо чаще встречались мутации в гене MTHFR (C677T) (p=0,031). ОШ для мутантного генотипа – 1.6 при (95% ДИ 1,0 – 4,7). Пятилетняя «почечная» выживаемость у носителей мутантного аллеля гена MTHFR (C677T) статистически значимо меньше (72,8%), чем у пациентов без данной мутации (81,9%) (р=0,027). Десятилетняя «почечная» выживаемость у носителей мутантного аллеля гена MTHFR (C677T) статистически значимо меньше (55,6%), чем у пациентов без данной мутации (70,5%) (р=0,016). У больных с ВН статистически значимо чаще встречались мутации в гене PAI-1 (4G/5G 675) (p=0,046). ОШ для мутантного генотипа – 1.7 (95% ДИ 1.0 – 4.7). ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Мутантные аллели генов MTHFR (C677T) и PAI-1 (4G/5G 675), вероятно, ассоциированы с развитием ВН. Полиморфизм гена MTHFR (C677T) связан с неблагоприятным течением ВН.

Для цитирования:


Борисов Е.Н., Иваницкий Л.В., Самоходская Л.М., Краснова Т.Н., Павликова Е.П., Камалов А.А. ВЗАИМОСВЯЗЬ АЛЛЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНОВ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА НА РАЗВИТИЕ И ТЕЧЕНИЕ ВОЛЧАНОЧНОГО НЕФРИТА. Нефрология. 2019;23(2):77-81. https://doi.org/10.24884/1561-6274-2019-23-2-77-81

For citation:


Borisov E.N., Ivanitsky L.V., Samokhodskaya L.M., Krasnova T.N., Pavlikova E.P., Kamalov A.A. INTERRELATION OF ALLELIC VARIANTS OF HEMOSTASIS SYSTEM GENES ON THE DEVELOPMENT AND COURSE OF LUPUS NEPHRITIS. Nephrology (Saint-Petersburg). 2019;23(2):77-81. (In Russ.) https://doi.org/10.24884/1561-6274-2019-23-2-77-81

ВВЕДЕНИЕ

Волчаночный нефрит (BH) - один из наиболее тяжелых висцеритов при системной красной вол­чанке (СКВ). Клинические и лабораторные при­знаки патологии почек наблюдаются у 50-70 % пациентов. [1]. Тромботическая микроангиопатия (ТМА) у таких больных вносит дополнительный вклад в поражение почек, ухудшает прогноз те­чения заболевания и снижает общую выживае­мость. Своевременная диагностика нарушений свёртывающей системы крови, присоединение к терапии антикоагулянтов улучшат исходы среди пациентов с BH, которые имеют ТМА [2].

Известно, что риск развития тромботических осложнений увеличивается при наличии дефек­тов в генах, влияющих на систему гемостаза. В развитии и течении нефрита в рамках СКВ иден­тифицировано множество потенциальных генети­ческих предикторов, однако, в настоящее время нет полного понимания ассоциации распределе­ния аллелей риска и клинических проявлений за­болевания. [3]

Цель: оценка влияния аллельных вариаций ге­нов системы гемостаза на развитие и течение вол- чаночного нефрита.

ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ

В исследование включены 100 пациентов с СКВ европеоидной расы. Все больные проходи­ли комплексное клинико-лабораторное обследо­вание в клинике нефрологии, внутренних и про­фессиональных болезней им. Е.М. Тареева Пер­вого МГМУ им. И.М. Сеченова. Половозрастная структура: 80 женщин и 20 мужчин в возрасте от 16 до 73 лет (средний возраст 37±14 лет). Дли­тельность наблюдения составляла для 73 боль­ных более 5 лет, для 18 - от 1 года до 5 лет и для 9 - менее 1 года. Повышение уровня креатинина в крови выше или равное 2 мг/дл считалось зна­чимым признаком нарушения экскреторной функ­ции почек. Больные с BH получали сочетанную иммуносупрессивную терапию преднизолоном и циклофосфаном или препаратами микофеноло- вой кислоты, в том числе в сверхвысоких дозах. Исследование полиморфизма генов проводили в лаборатории генных и клеточных технологий кафедры биохимии и молекулярной медицины факультета фундаментальной медицины МГУ им. М.В. Ломоносова с помощью аллельспеци- фичной полимеразной цепной реакции и электро­фореза в агарозном геле.

Статистический анализ полученных данных проводили с использованием общепринятых па­раметрических и непараметрических методов. Применяли стандартные методы описательной статистики. Центральные тенденции при нор­мальном распределении признака оценивали по величине средних значений и среднеквадратиче­ского отклонения (Μ±σ); при асимметричном - по медиане и доверительному интервалу (ДИ). Статистическую значимость межгрупповых раз­личий количественных переменных определяли с помощью дисперсионного анализа (ANOVA), критерии Манна - Уитни или Уилкоксона, би­нарных переменных - с помощью х2-критерия. Отношение шансов (ОШ) рассчитывали в ходе логистического регрессионного анализа. Оценку «почечной» выживаемости (ПВ) проводили мето­дом Каплана-Мейера. Нулевую гипотезу (ошибка первого рода) отвергали при p<0,05. Для расчетов использовали пакет прикладных статистических программ «Statistica Ver. 12.0» («StatSoft, Inc.», США).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Среди пациентов, включенных в исследование, поражение почек выявлено у 61 человека (61 %). У 33 из них (54,1 %) наблюдался вариант почеч­ной патологии по типу быстропрогрессирующе­го волчаночного нефрита (БПВН). У пациентов с медленнопрогрессирующим течением пораже­ния почек (20 человек - 32.7 %) ведущим в клини­ческой картине заболевания был нефротический синдром (НС) (13 пациентов - 65 %), у 7 паци­ентов (35 %) - мочевой синдром. У 8 пациентов (13,2 %) поражение почек протекало латентно.

У больных с ВН статистически значимо чаще встречались мутации в гене MTHFR (C677T) (p=0,033). Стандартная ошибка доли мутантного генотипа (ММ - 34,4 %) составила 9,2 %, ОШ для мутантного генотипа - 6,1 (95 % ДИ 1,6 - 22,3 (табл. 1).

У больных с БПВН статистически значимо чаще встречались мутации в гене MTHFR (C677T) (p=0,031). Стандартная ошибка доли мутантного генотипа (ММ - 39,8 %) составила 9,8 %, ОШ для мутантного генотипа - 1,6 (95 % ДИ от 1,0 - 4,7), табл. 2.

 

Таблица 1 / Table 1

Полиморфизм аллелей и генотипов гена белка MTHFR (C677T) у больных с ВН и без него

Polymorphism of alleles and genotypes of the MTHFR protein gene (C677T) in patients with and without BH

Клинический признак

N

M

NN

NM

MM

Всего пациентов

СКВ с нефритом

42,3 %

57,7 %

21,3 % (13)

44,3 % (27)

34,4 % (21)

61

СКВ без нефрита

67,6 %

32,4 %

48,7 % (19)

43,6 % (17)

7,7 % (3)

39

p

p=0,028

p=0,033

 

Примечание. Здесь и в табл. 2-3: N - мажорный аллель; M - минорный аллель.

 

 

Таблица 2 / Table 2

Полиморфизм аллелей и генотипов гена белка MTHFR (C677T) у больных с БПВН и с другими вариантами нефрита

Polymorphism of alleles and genotypes of the MTHFR gene (C677T) in patients with BPVN and with other nephritis variants

Клинический признак

N

M

NN

NM

MM

Всего пациентов

БПВН

35,4 %

64,6 %

18,9 % (6)

41,3 % (14)

39,8 % (13)

33

Другие варианты ВН

72,1 %

27,9 %

32,1 % (9)

39,3 % (11)

28,6 % (8)

28

p

p=0,039

p=0,046

 

 

Таблица 3 / Table 3

Полиморфизм аллелей и генотипов гена белка PAI-1 (4G/5G 675) у больных с ВН и без него

Polymorphism of alleles and genotypes of the PAI-1 protein gene (4G / 5G 675) in patients with and without lupus nephritis

Клинический признак

N

M

NN

NM

MM

Всего пациентов

СКВ с нефритом

54,8 %

45,2 %

24,6 % (15)

47,5 % (29)

27,9 % (17)

61

СКВ без нефрита

60,1 %

39,9 %

35,9 % (14)

46,2 % (18)

17,9 % (7)

39

p

p=0,045

p=0,048

 

Под «почечной» выживаемостью (ПВ) понима­ли долю больных, у которых произошло снижение экскреторной функции почек (повышение уровня креатинина в крови более 2 мг/дл). Пятилетняя «почечная» выживаемость у носителей мутант­ного аллеля гена MTHFR (C677T) статистически значимо меньше, чем у пациентов без данной му­тации 72,8 (95 % ДИ от 62,6 - 75,3 %) и 81,9 % (95 % ДИ 78,1 - 86,7 %) соответственно, р=0,027.

Десятилетняя «почечная» выживаемость у но­сителей мутантного аллеля гена MTHFR (C677T) статистически значимо меньше, чем у пациентов без данной мутации 55,6 (95 % ДИ 42,5 - 65,1 %) и 70,5 % (95 % ДИ 65,9 - 79,7 %) соответственно, р=0,016 (рисунок).

У пациентов с ВН при наличии мутантного аллеля MTHFR (C677T) отмечался больший уро­вень протеинурии в рамках НС (в среднем 6,8 ± 1,2 г/л) по сравнению с таковым у пациентов без мутантного аллеля данного гена (средняя протеи- нурия 2,4 ± 0.5 г/л ), p=0,037.

У больных с ВН статистически значимо чаще встречались мутации в гене PAI-1 (4G/5G 675), p=0,046. Стандартная ошибка доли мутантного генотипа (ММ - 28,1 %) составила 6,5 %, ОШ для мутантного генотипа - 1,7 при (95 % ДИ 1,0 - 4,7), табл. 3.

Связь полиморфизма PAI-1 (4G/5G 675) с вари­антом течения ВН и «почечной» выживаемостью статистически недостоверна.

Не выявлено ассоциации с развитием и тече­нием ВН с полиморфизмом генов фактора XIII - FXIII (G485T), гликопротеина Ia - GPIa (C807T) и гликопротеина IIIa - GPIIIa (T196C), субъединицы p22phox NADH-оксидазы - p22phox (C242T), эндотелиальной NO-синтазы - eNOS (G894T).

 

Рисунок. Почечная выживаемость у больных с СКВ в зависимости от наличия мутантного аллеля гена MTHFR (C677T).

Figure. Renal survival in patients with SLE, depending on the presence of the mutant allele of the MTHFR gene (C677T).

 

ОБСУЖДЕНИЕ

При наличии минорного аллеля MTHFR (C677T) повышается риск развития ТМА, в том числе приводящей к поражению клубочкового ап­парата почек.

Сочетание иммунокомплексного поражения и ТМА ведет к повышенному риску развития не­фрита и его тяжелому течению у больных с СКВ.

Описан частый полиморфизм, заключающийся в замене цитозина на тимин в 677-м положении гена (C677T), кодирующего MTHFR, фермент участвующий в метаболизме гомоцистеина.

В результате происходит замена Glu на Ala в первичной структуре белка, что, в свою очередь, приводит к образованию термолабильного и ме­нее активного варианта фермента. Это ведет к уменьшению образования 5-метилтетрагидрофолата и, соответственно, метионина из гомоцистеина и накоплению последнего. Нарушение метаболизма гомоцистеина вследствие мутации в гене MTHFR (C677T) является фактором риска тромботических осложнений [4].

Протромботический эффект при этом обуслов­лен поражением эндотелия сосудистого русла. Обнажается субэндотелиальный матрикс, изме­няется активность эндотелиальной NO-синтазы (eNOS), изменяется пролиферация гладкомышеч­ных клеток, что приводит к активации тромбоци­тов, фактора XII и фактора V Все это способствует реакции трасформации протромбина в тромбин [5].

Ингибитор активатора плазмино- гена-1 (PAI-1) является ингибитором фибринолиза и участвует в отложе­нии фибрина в почечных клубочках. Инсерционно-делеционный 4G/5G по­лиморфизм (rs 1799889(-)): выпадение одного из пяти гуаниновых нуклео­тидов в (-675) позиции промоторной области. Аллель 5G имеет меньшую транскрипционную активность, нали­чие мутантной аллели 4G приводит к повышению активности PAI-1 и склон­ности к тромбозам. По результатам недавнего мета-анализа показано, что пациенты с аллелью 4G имеют большие шансы тромботических осложнений, чем пациенты с генотипом 5G/5G [6]. Поскольку активация передачи сигна­лов гломерулярного Toll-подобного ре­цептора 3 (TLR3), по сообщениям, играет ключе­вую роль в патогенезе волчаночного нефрита (LN). TLR3-опосредованная экспрессия PAI-1 в гломеру­лярных эндотелиальных клетках человека может влиять на развитие ВН [7, 8]. Таким образом, по­лиморфизм PAI-1 (4G/5G 675), вероятно, ассоции­рован с повышенным риском развития ВН.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Мутантные аллели генов MTHFR (C677T) и PAI-1 (4G/5G 675), вероятно, связаны с развити­ем BH. Полиморфизм гена MTHFR (C677T) обу­славливает неблагоприятное течение BH. Опреде­ление наследственных факторов риска развития нефрита в рамках СКВ позволит своевременно диагностировать и начинать лечение, используя подходы персонифицированной медицины.

Список литературы

1. Краснова ТН. Поражение почек при системной красной волчанке: современные представления о патогенезе, клинике, подходы к лечению. Современная ревматология 2008;2(3):18– 21. https://Doi.org/10.14412/1996- 7012-2008-483

2. Turrent-Carriles A, Herrera-Félix JP, Amigo MC. Renal Involvement in Antiphospholipid Syndrome. Front Immunol 2018; 9:1008. Doi: 10.3389/fimmu.2018.01008

3. Flores-Mendoza G, Sansón SP, Rodríguez-Castro S et al. Mechanisms of Tissue Injury in Lupus Nephritis. Trends Mol Med 2018;24(4):364–378. Doi: 10.1016/j.molmed.2018.02.003

4. Santilli F, Davì G, Patrono C. Homocysteine, methylene tetrahydrofolate reductase, folate status and atherothrombosis: A mechanistic and clinical perspective. Vascul Pharmacol 2016;78:1–9. Doi: 10.1016/j.vph.2015.06.009

5. Yuyun MF, Ng LL, Ng GA. Endothelial dysfunction, endothelial nitric oxide bioavailability, tetrahydrobiopterin, and 5-methyltetrahydrofolate in cardiovascular disease. Where are we with therapy? Microvasc Res 2018;119:7–12. Doi: 10.1016/j. mvr.2018.03.012

6. Liu Y, Cheng J, Guo X et al. The roles of PAI-1 gene polymorphisms in atherosclerotic diseases: A systematic review and metaanalysis involving 149,908 subjects. Gene 2018;673:167–173. Doi: 10.1016/j.gene.2018.06.040

7. Hamano K, Iwano M, Akai Y et al. Expression of glomerular plasminogen activator inhibitor type 1 in glomerulonephritis. Am J Kidney Dis 2002;39:695–705. Doi: 10.1053/ajkd.2002.31986

8. Liu Q, Imaizumi T, Kawaguchi S et al. Toll-like receptor 3 signaling contributes to regional neutrophil recruitment in cultured human glomerular endothelial cells. Nephron 2018;139:349–358


Об авторах

Е. Н. Борисов
Медицинский научно-образовательный центр, Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
Россия
врач-терапевт


Л. В. Иваницкий
Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского
Россия

доц., кафедра общей врачебной практики (семейная медицина)

 



Л. М. Самоходская
Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова
Россия

доц., лаборатория генных и клеточных технологий кафедры биохимии и молекулярной медицины факультета фундаментальной медицины, зав. лабораторией



Т. Н. Краснова
Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова
Россия
доц., факультет фундаментальной медицины, кафедра внутренних болезней


Е. П. Павликова
Медицинский научно-образовательный центр, Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
Россия
Проф., заведующая отделом внутренних болезней


А. А. Камалов
Медицинский научно-образовательный центр, Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
Россия
Проф., директор Медицинского научно-образовательного центра, академик РАН.


Для цитирования:


Борисов Е.Н., Иваницкий Л.В., Самоходская Л.М., Краснова Т.Н., Павликова Е.П., Камалов А.А. ВЗАИМОСВЯЗЬ АЛЛЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНОВ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА НА РАЗВИТИЕ И ТЕЧЕНИЕ ВОЛЧАНОЧНОГО НЕФРИТА. Нефрология. 2019;23(2):77-81. https://doi.org/10.24884/1561-6274-2019-23-2-77-81

For citation:


Borisov E.N., Ivanitsky L.V., Samokhodskaya L.M., Krasnova T.N., Pavlikova E.P., Kamalov A.A. INTERRELATION OF ALLELIC VARIANTS OF HEMOSTASIS SYSTEM GENES ON THE DEVELOPMENT AND COURSE OF LUPUS NEPHRITIS. Nephrology (Saint-Petersburg). 2019;23(2):77-81. (In Russ.) https://doi.org/10.24884/1561-6274-2019-23-2-77-81

Просмотров: 269


ISSN 1561-6274 (Print)
ISSN 2541-9439 (Online)