Preview

Нефрология

Расширенный поиск

ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ЦИТОКИНОВОГО ПРОФИЛЯ СЫВОРОТКИ КРОВИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ ПОЧЕК У ДЕТЕЙ

https://doi.org/10.24884/1561-6274-2018-22-4-81-89

Полный текст:

Аннотация

ЦЕЛЬ: изучить диагностическую и прогностическую значимость определения показателей цитокинового статуса сыворотки крови у детей с различными нозологическими формами заболеваний почек.

ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ. Под наблюдением находились 255 детей с различными  заболеваниями почек [с мочекаменной болезнью (МКБ) – 16, с воспалительными  заболеваниями почек (МВЗП) – 174, с гломерулопатиями (ГН) – 65]. Во всех группах  обследуемых преобладали дети с 1-й и 2-й стадией ХБП (100, 97,5 и 95,4% соответственно). Контрольную группу составили 50 практически здоровых детей. У всех обследованных  определяли содержание в сыворотке крови TNF-α, TNF-RI и TNF-RII, IL- 10, TGF-β1 и TGF-β3, IL-2, IL-2-SR).

РЕЗУЛЬТАТЫ. Повышение уровня TNF-α сыворотки крови можно рассматривать как высокоспецифичный маркер хронизации острого пиелонефрита, тогда как снижение  концентрации TNF-RII – отнести к показателям полной клинико-лабораторной ремиссии  пиелонефрита. Повышение TNF-α и TNF-RI можно также рассматривать в качестве маркера  аутоимунного воспаления. Дефицит IL-2, IL-10 и TGF-β3 при повышении IL-2 R в крови необходимо использовать как маркер воспалительных и аутоиммунных заболеваний  почек, а повышение TGF-β1 – как ранний маркер развития нефросклероза, особенно у  больных с гломерулонефритом. Увеличение TNF-α/ИЛ-10 более чем в 4 раза дает  возможность позиционировать его в качестве дополнительного диагностического критерия  воспалительного и аутоиммунного процесса в почках. Увеличение экскреции с мочой TNF-α  на фоне снижения ИЛ-10 с сохранением стабильно высоких концентраций TGF-β1 является  маркером воспаления и фиброза при воспалительных заболеваниях почек и  гломерулонефритах. Своевременная нефропротективная терапия, направленная на  торможение прогрессирования ХБП и ее осложнений, должна включать и модуляцию цитокинового статуса.

Для цитирования:


Семешина О.В., Лучанинова В.Н., Ни А., Маркелова Е.В., Горелик Н.В., Крутова А.С., Быкова О.Г. ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ЦИТОКИНОВОГО ПРОФИЛЯ СЫВОРОТКИ КРОВИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ ПОЧЕК У ДЕТЕЙ. Нефрология. 2018;22(4):81-89. https://doi.org/10.24884/1561-6274-2018-22-4-81-89

For citation:


Semeshina O.V., Luchaninova V.N., Nee A., Markelova E.V., Gorelik N.V., Krutova A.S., Bykova O.G. DIAGNOSTIC SIGNIFICANCE OF BLOOD SERUM CYTOKINE PROFILE FOR CHRONIC KIDNEY DISEASE IN CHILDREN. Nephrology (Saint-Petersburg). 2018;22(4):81-89. (In Russ.) https://doi.org/10.24884/1561-6274-2018-22-4-81-89

ВВЕДЕНИЕ

Начало XXI века во всем мире ознаменовано ростом распространенности хронической болезни почек (ХБП) уже в детском возрасте, снижением качества жизни и социальной активности пациен­тов [1-6]. Морфологической основой дисфункции почек при ХБП является нефросклероз [7]. Дет­ский возраст представляет собой уникальный пе­риод жизни человека, когда нефропротективные мероприятия наиболее эффективны. Поэтому по­иск биомаркеров повреждения почечной ткани, как прогностически значимых факторов развития нефросклероза, имеет особое значение в педиа­трии [7-11].

Участие цитокинов в патогенезе различных заболеваний почек подтверждено результатами ряда исследований последних лет [12-17]. Пока­зано, что цитокины могут синтезироваться эпите- лиоцитами проксимальных канальцев, оказывая в дальнейшем пара- или аутокринное влияние на клетки-мишени, стимулируя процессы клеточ­ной пролиферации, дифференцировки, роста и секреции [18, 19]. Несмотря на локальный харак­тер действия, некоторые из них обнаруживаются в системном кровотоке и биологических жидко­стях, что может иметь диагностическое значение при заболеваниях почек [20, 21]. Однако большая часть исследований в настоящее время посвяще­ны цитокинам при отдельных группах или нозо­логических формах болезней почек без акцента на стадию ХБП и без сравнения изучаемых показа­телей в зависимости от первичного заболевания [12-17].

Цель исследования - изучение диагностиче­ской и прогностической значимости определе­ния показателей цитокинового статуса сыворотки крови у детей с различными нозологическими формами заболеваний почек.

ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ

Под наблюдением находились 255 детей с раз­личными заболеваниями почек. Контрольную группу составили 50 практически здоровых де­тей. Больные были распределены на 3 группы: 1-я группа - 16 детей с мочекаменной болез­нью (МКБ) и дисметаболической нефропатией (ДМН) без инфекции, 2-я группа - 174 ребенка с микробно-воспалительными заболеваниями почек (МВЗП), 3-я группа - 65 детей с гломерулопатиями (ГН). Среди детей с МВЗП было 165 наблюдений с острым и хроническим пиело­нефритом и 9 - с циститом. Развитие микробно­воспалительного процесса в мочевой системе было обусловлено следующими факторами: ВПР МВС - 40, из них пузырно-мочеточниковый реф- люкс - 11, гидронефроз - 10, удвоение почек - 9, кисты почек - 3, гипоплазия почки - 3, стеноз пиелоуретрального сегмента - 2, тазовая дисто­пия - 2; ДМН - 80; нейрогенный мочевой пузырь (НМП) - 26 детей. При ХБП в зависимости от ста­дии выявлена различная патология. При 1 ст. - это ДМН и НДМП (средний возраст детей 9,1 года), при 2 ст. - ВПР МВС (представленные выше) и ДМН (средний возраст детей 6,8 года). Причем, у больных с ХБП 2 ст. в 70% случаев отмечалось сочетание нескольких факторов. При 3 ст. - ПМР, рефлюкс-нефропатия (мальчик 16 лет и девоч­ка 13 лет), при 4 ст. - гидронефроз обеих почек (мальчик 1 год), при 5 ст. - кистозная дисплазия обеих почек (мальчик 15 лет),

Длительность болезни во всех группах наблю­даемых больных была больше 3 мес. У каждого ребенка определена стадия ХБП согласно клас­сификации National Kidney Foundation-K/DOQI (2003) в соответствии с уровнем СКФ, рассчитан­ной по формуле Шварца (2009) [22, 23] (табл.1).

Преобладали дети с 1-й и 2-й стадией ХБП. Поэтому показатели цитокинового профиля детей с ХБП С3-5 стадией (ХПН) использовали только для оценки воспалительного индекса (ВИ), кото­рый рассчитывали как соотношение про- и проти­вовоспалительных цитокинов [13, 14].

Средний возраст обследованных детей: 1-я группа - 10,7 ±2,7 года, 2-я группа - 8,7 ± 0,7 года, 3-я группа - 9,1 ± 1,1 года, p>0,1. По половому со­ставу в 1-й и 3-й группах преобладали мальчики (87,5 и 60% соответственно), а во 2-й - девочки (83,3%).

Всем обследуемым было выполнено количе­ственное определение в сыворотке крови следу­ющих цитокинов: TNF-α (tumor necrosis factor a, фактор некроза опухоли альфа), TNFRI и TNFRII (tumor necrosis factor I and II receptor, рецепто­ры I и II к фактору некроза опухоли), IL-10 (in­terleukin-10, интерлейкин-10), TGFβ1 и TGFβ3 (transforming growth factor-β, трансформирую­щий фактор роста-β 1-го и 3-го типов), IL-2 (in­terleukin-2, интерлейкин-2), IL-2-SR (interleu­kin-2 solublereceptor, растворимый рецептор к интерлейкину-2). Забор крови осуществляли у каждого ребенка в утреннее время натощак, да­лее образцы крови хранили при -76 °С. Иссле­дование проводили методом сэндвич-варианта твердофазного иммуноферментного анализа, с использованием специфических реактивов фир­мы «R&DDiagnostics Inc» (США) в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя. Учет результатов производили с помощью иммуноферментного анализатора «Multiscan» (Финляндия). Расчеты количества показателей осуществляли путем построения калибровочной кривой с помо­щью компьютерной программы, выражали в пг/ мл или нг/мл. Образцы крови исследовали в ли­цензированной лаборатории химии неинфекцион­ного иммунитета Федерального государственного бюджетного учреждения науки «Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Еляко- ва» Дальневосточного отделения Российской ака­демии наук (руководитель отдела, д-р хим. наук проф. П.А. Лукьянов).

 

Таблица 1 / Table 1

Распределение больных в зависимости от стадии ХБП

Distribution of patients depending on the stage of CKD

Стадии ХБП

Болезни органов мочевой системы (абс., %)

ДМН и МКБ (n=16)

МВЗП (n =174)

ГН (n

=65)

Абс.

%

Абс.

%

Абс.

%

С1

13

81,3

145

83,3

56

86,2

С2

3

18,7

25

14,4

6

9,2

С3

0

0

1

0,6

2

3,1

С4

0

0

2

1,1

1

1,5

С5

0

0

1

0,6

0

0

Всего

16

100

174

100

65

100

Статистический анализ полученных данных проводили с использованием пакета приклад­ных программ «Statistica 10» («StatSoft», США), «Microsoft Excel 10». Для оценки показателей цитокинов применяли непараметрическую статисти­ку и анализ качественных данных («U-критерий Манна-Уитни», р - значение двустороннее, рас­чет значения критерия корреляции R, медианы и квартилей). Для оценки цитокинового профиля крови у детей 3-й группы (МВЗП) использовали параметрическую статистику: средние величины признаков (М), ошибки средних величин (± mx), для оценки статистической значимости получен­ных результатов в расчетах применяли t-критерий Стьюдента. Для определения клинической значи­мости показателя TNF-α применялся ROC-анализ (Receiver Operator Characteristic) - метод линей­ной регрессии с построением ROC-кривых, ко­торый позволяет оценить качество модели (диа­гностического признака - его чувствительности и специфичности), с использованием программы Med Calc. При этом учитывался показатель AUC (Area Under Curve). О качестве теста судили по экспертной шкале для значений AUC. Нулевую статистическую гипотезу об отсутствии различий и связей отвергали при p<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Фактор некроза опухоли альфа (ФНО-альфа, TNF-α) - это провоспалительный цитокин, синте­зирующийся в основном моноцитами и макрофа­гами [20, 21]. В нашем исследовании у всех боль­ных с заболеваниями почек уровень TNF-a в крови выше, чем у здоровых детей, причем достоверно выше у детей с МВЗП и ГН (табл. 2). Интересен тот факт, что у всех больных с заболеваниями по­чек уровень TNF-a в моче также достоверно выше (собственные исследования), чем у здоровых де­тей, наиболее высокий его показатель был обна­ружен в группе больных с гломерулонефритами [24], что совпадает с данными других исследова­телей [14, 25-27]. И.И. Жизневская и соавт. (2014) показали, что дебют гломерулопатий независимо от дальнейшего их течения характеризовался вы­соким уровнем ФНО-альфа, что свидетельствует о выраженности воспалительного иммунопатоло­гического процесса в почках при изучаемой пато­логии [14].

При выполнении бинарного логистическо­го регрессионного анализа и построении ROC- кривой для показателя TNF-a определялось рас­положение кривой в левом верхнем углу как у детей с МВЗП, так и у детей с ГН. Интервал AUC под кривой для данных групп наблюдения был практически одинаковым (0,8). Это доказывает, что качество модели (по экспертной шкале) очень хорошее.

Известно, что множественные активности TNF реализируются через два типа рецепторов - тип 1 и тип 2 [20].Растворимые рецепторы связывают и нейтрализуют TNF-α. Показатель TNFRte крови у всех больных выше, чем у здоровых детей, но до­стоверных различий между всеми группами детей не обнаружено, причем наиболее высокий TNFRfy детей с гломерулонефритами в 1,3 раза по сравне­нию с контрольной группой. TNFRII в крови у всех наблюдаемых больных детей (группы 2-4) ниже, чем у здоровых. Самый низкий показатель TNFRII в крови обнаружен в группе детей с МВЗП, что ста­тистически значимо (р<0,05) (табл. 2).

При анализе содержания TNF-α в крови у де­тей с острым (п=35) и хроническим пиелонефри­том (п=80) (ПН) в динамике заболевания выявле­но достоверное его повышение при остром пиело­нефрите по сравнению с показателями контроль­ной группой (п=22) (21,87 ± 5,23 и 4,28 ± 0,67 пг/мл соответственно; р ≤ 0,005). Установлено достоверное увеличение TNF-α и у детей с хро­ническим пиелонефритом при обострении болез­ни (п=43), частичной (п=10) и полной клинико­лабораторной ремиссии (п=27) по сравнению с контрольной группой (26,25 ± 4,77; 19,44 ± 3,51; 17,52 ± 3,47 пг/мл соответственно р ≤ 0,001) (рис. 1). В исследованиях О.Г. Быковой (2013, 2014) также статистически доказано повышение TNF-α в крови у детей на всех стадиях хрониче­ского пиелонефрита [16, 29].

При анализе показателей растворимого рецеп­тора II фактора некроза опухоли-α выявлено зна­чительное достоверное снижение растворимого рецептора II фактора некроза опухоли-α в крови у больных с острым пиелонефритом (1381,81 ± 167,79 пг/мл; р≤ 0,002) по сравнению с показате­лем контрольной группы (2897,94 пг/мл) (рис. 2).

При хроническом пиелонефрите также опре­делено достоверное снижение уровня sTNFRII в крови у больных на всех стадиях, при этом более значимое его снижение отмечено в активной ста­дии (1766,37 ± 118,11 пг/мл; р≤ 0,02). В стадии частичной клинико-лабораторной ремиссии пока­затель sTNFRII равен 1813,83 ± 155,49 пг/мл (р< 0,05) и полной клинико-лабораторной ремиссии - 1993,24 ± 159,46 пг/мл (р <0,05) по сравнению с показателем контрольной группы (2897,94 пг/мл) (рис. 2).

 

Таблица 2 / Table 2

Содержание TNF-α и его растворимых рецепторов I и II типа в сыворотке крови у детей с заболеваниями почек

The content of TNF-α and its soluble Type I and II receptors in serum in children with kidney disease

Примечание. Здесь и в табл. 3, 4: результаты представлены в виде медианы, нижнего и верхнего квартилей М (Q25-Q75). P1 - р2 - достоверность различий между здоровыми детьми и детьми с МКБ и ДМН; р, - р3 - достоверность различий между здоровыми детьми и детьми МВЗП; р1 - р4 - достоверность различий между пациентами с ГН и здоровыми детьми.

 

Таблица 3 / Table 3

Содержание IL-2 и его растворимого рецептора в сыворотке крови у детей с заболеваниями почек

The conoentration of IL-2 and its soluble serum receptor in children with kidney disease

Показатель

Здоровые дети

Дети с МКБ и ДМН

Дети с МВЗП

Дети с ГН

Уровень значимости (р)

1

2

3

4

IL-2, пг/мл

(n=50)

9,0

(3,7-19,9)

(n=2)

7,1

(6,3-7,8)

(n=21)

0,4

(0,3-62,2)

(n=16)

10,4

(0,3-970,5)

р1- р3<0,001

р3- р4<0,05

IL-2 R, пг/мл

(n=50)

356,4

(207,3-564,1)

(n=2)

544,3

(325,1-763,4)

(n=21)

436,2

(180,7-971,9)

(n=16)

458,4

(307,3-861,2)

 

 

Рис. 1. Концентрация TNF-α в крови у детей с пиелонефритом.

Figure 1. TNF-α concentration in the blood of children with py­elonephritis.

 

 

Рис. 2. Концентрация sTNFRII в крови у детей с пиелонеф­ритом.

Figure 2. Concentration of sTNFRII in the blood of children with pyelonephritis.

Интерлейкин-2 (IL-2) - растворимый глико­протеид, являющийся провоспалительным цитокином, медиатором иммунитета и воспаления. Он продуцируется Т-клетками в ответ на антигенную и митогенную стимуляцию [20].В нашем исследо­вании IL-2 в крови у больных с МВЗП достовер­но ниже по сравнению с группой здоровых детей (р<0,001). Однако уровень рецептора IL-2 R выше у всех детей с заболеваниями почек по сравнению с показателями контрольной группы (табл. 3). В исследованиях, проводимых нами ранее, показа­тель IL-2 в моче у всех больных достоверно ниже по сравнению с группой здоровых детей (р<0,05). Самый низкий показатель оказался у детей с об­менными нарушениями. Однако уровень рецепто­ра IL-2 R в моче достоверно выше у детей с МВЗП и детей с ГН по сравнению с группой здоровых детей. Самый высокий статистически значимый показатель зарегистрирован у детей с МВЗП, что вполне закономерно (р<0,05) [24].

IL-10 относится к группе противовоспалитель­ных цитокинов [20]. В нашем исследовании пока­затель IL-10 в крови у больных детей всех групп оказался достоверно меньше, чем в контрольной группе (табл. 4). Самый достоверно значимый низкий показатель IL-10 в крови обнаружен в группе детей с МВЗП (р<0,001). Полученные дан­ные совпадают с данными других исследователей [12, 15].

В крови нами исследованы противовоспали­тельные цитокины: TGF-β1 и TGF-β3. Выявлено, что уровень цитокина TGFβ1 у пациентов 4-й группы достоверно (и закономерно) выше, чем у детей контрольной группы (р<0,05). Интерес­но, что уровень цитокина TGFβ3 у детей с обменными заболеваниями оказался также выше, чем у здоровых детей. У детей с МВЗП и ГН показательTGF-β3 в крови оказался достоверно ниже по сравнению с детьми контрольной группы (см. табл. 4).

Известно, что при определении биомаркеров воспаления необходимо исследовать не только уровень цитокинов, но и их соотношений, что позволяет оценить относительный дефицит или гиперпродукцию изучаемых медиаторов [15]. В нашем исследовании мы использовали показатель цитокинового воспалительного индекса (ВИ), который рассчитывали как соотношение про- и противовоспалительных цитокинов. Итак, при оценке ВИ Т№-а/ИЛ-10 определен достоверно высокий его уровень у всех пациентов, особенно у детей с МВЗП (3-я группа наблюдения) индекс наиболее высокий (1,41±0,19, n=50), чем у здоро­вых детей (0,13±0,02, n=50), р<0,001 (табл. 5).

 

Таблица 4 / Table 4

Содержание противовоспалительных цитокинов в сыворотке крови у детей с заболеваниями почек

The contentration of anti-inflammatory cytokines in the blood serum in children with kidney disease

Показатель

Здоровые дети

Дети с МКБ и ДМН

Дети с МВЗП

Дети с ГН

Уровень значимости (р)

1

2

3

4

IL-10, пг/мл

(n=50 )

36,7

(20,7-60,1)

(n=8 )

14,5

(6,4-25,8)

(n=78 ) 10,0

(1,9-26,8)

(n=24)

12,6

(6,8-38,1)

р1– р2<0,05
р1– р3<0,001
р1– р4<0,01

TGF-β1, нг/мл

(n=50 )

15,1

(12,4-36,8)

(n=2)

18,5

(13,9-22,9)

(n=12)

18,2

(12,2-22,3)

(n=13)

35,5

(22,3-43,6)

р1- р4<0,05

TGF-β3, пг/мл

(n=50 )

112,2

(106,0-126,4)

(п=8)

123,3

(46,7-291,5)

(п=74)

63,6

(19,3-110,7)

(п=13)

52,1

(29,9-92,8)

р1- р3<0,05

р1- р4<0,05

 

Таблица 5 / Table 5

Воспалительный индекс TNF-a/ИЛ-10

The inflammatory index TNF-α / IL-10

Показатель

Контрольная группа

Дети с МКБ и ДМН

Дети с МВЗП

Дети с ГН

Уровень значимости (р)

1

2

3

4

ΤΝΡ-α/ИЛ-Ю

0,13±0,02

(n=50)

0,56±0,2

(n=9)

1,41±0,16

(n=76)

0,9±0,19

(n=23)

p1- р2<0,05

р1- рз<0,001

р14<0,01

р2- рз<0,01

р3- р4<0,05

ОБСУЖДЕНИЕ

Фактор некроза опухолей (TNF-α) относит­ся к провоспалительным цитокинам, роль его в прогрессировании ХБП исследована достаточно широко. Известно, что персистентное увеличение TNF ассоциируется с развитием недостаточности многих органов и летальностью, вызывая гипо­тензию, тахипноэ, диарею, гематурию, тромбопо- эз, метаболический ацидоз, а также многочислен­ные повреждения тканей, обычно наблюдаемые при остром воспалении. Кроме того, он характе­ризуется как фактор, вызывающий атрофию [20]. Однако же TNFRII ограничивает воспаление. В нашем исследовании повышение активности TNF-α сопровождается снижением растворимого TNF-RII в сыворотке крови, что свидетельствует о сохранении активности воспалительного про­цесса, особенно при обострении хронического пиелонефрита. sTNF-RII может быть использован в качестве дополнительного маркера воспаления почечной ткани. Выявлена положительная кор­реляционная связь между TNF-α и TNF-α RI (R = 0,58) у больных с ГН. TNF-α RI в этой группе наиболее высокий. Кроме того, в группах детей с МВЗП и ГН (3-я и 4-я группы наблюдения) по­казатель AUC составил 0,8. Это доказывает, что качество модели (по экспертной шкале) очень хо­рошее (по терминологии метода) и позволяет ре­комендовать использование данного показателя в сыворотке крови в качестве дополнительного диа­гностического критерия развития воспаления (как специфичного и чувствительного маркера острого пиелонефрита и его хронизации). Одновременно, учитывая, что расположение ROC кривой TNF-α определялось в левом верхнем углу как у детей с МВЗП, так и у детей с ГН и интервал AUC для данных групп наблюдения был одинаковым (0,8), можно говорить о TNF-α как критерии иммунного воспаления почек.

Основной биологический эффект IL-2, благо­даря которому он получил название ростового фактора лимфоцитов, заключается в стимуля­ции пролиферации различных клеточных ти­пов [20]. IL-2 стимулирует клеточное деление как Т-лимфоцитов хелперов, синтезирующих его в ответ на антигенную стимуляцию, так и Т-лимфоцитов киллеров, действующих по ауто- кринному и паракринному типу. Кроме того, IL-2 в В-лимфоцитах стимулирует выработку антител, в моноцитах - продукцию провоспалительных цитокинов, фагоцитоз и бактерицидность [20, 21]. В ряде работ выявлено, что в лимфоцитах больных с идиопатическим нефротическим син­дромом отмечаются высокие концентрации ИЛ-2, при этом уровень ИЛ-2 повышен при обострении и остаётся нормальным в ремиссии [14, 28]. До­казано, что в реализации поражения почек при хронической герпес-вирусной инфекции имеет значение нарушение клеточного иммунного от­вета вследствие измененной функции инфициро­ванных вирусом В-лимфоцитов и моноцитов. Так у детей с герпетической инфекцией и мембраноз­ной нефропатией выявлена резко сниженная про­дукция IL-2 [29]. В нашем исследовании IL-2 кро­ви у больных с МВЗП достоверно ниже по сравне­нию с группой здоровых детей (р<0,001). Однако уровень его рецептора IL-2 R выше у всех детей с заболеваниями почек, но достоверных различий обнаружено не было. Нами выявлена положитель­ная корреляция между TNF-α и IL-2 R (R = 0,51) в крови у детей с ГН. Таким образом, воспалитель­ные и аутоиммунные реакции у дефицитных по IL-2 больных детей можно объяснить снижением клеточного иммунитета, развитием лимфопролиферации и аутоиммунных расстройств. Повы­шение уровня IL-2 R можно отнести к маркерам воспаления [20].

Установлено, что показатель IL-10 в крови у здоровых детей достоверно выше, чем у наблюда­емых больных с заболеваниями почек. В исследо­вании, проводимом нами ранее, показатель IL-10 в моче у больных детей всех групп также оказался меньше, чем у здоровых детей. Самый достовер­но значимый низкий показатель IL-10 в моче об­наружен в группе детей с МВЗП (р<0,05), что за­кономерно, учитывая патогенез этих заболеваний [24]. Это объяснимо с учетом известных данных о свойствах данного цитокина: IL-10 - противо­воспалительный цитокин, супрессирующий про­дукцию провоспалительных цитокинов и являю­щийся существенным ингибитором клеточного иммунитета [20, 21]. Нами выявлена положитель­ная корреляционная связь между IL-10 и IL-2 (R = 0,91) в крови у детей с МВЗП, что доказывает роль дефицита цитокинов ИЛ-10 и IL-2 в сниже­нии клеточного иммунного ответа у больных с за­болеваниями почек.

TGF-β - противовоспалительный цитокин, бе­лок, контролирующий пролиферацию, клеточную дифференцировку и другие функции большинства клеток. Семейство трансформирующих ростовых факторов (TGF) у человека включает 3 основных: TGF-β1, TGF-β2, TGF-β3[20]. Цитокины семейства TGF имеют различное биологическое действие: изменение пролиферации клеток, в большинстве случаев - подавление; усиление формирования внеклеточного матрикса за счет активации син­теза его компонентов и подавления деградации; иммуносупрессивное действие [20]. При разви­тии патологии TGFβ1 является основным медиа­тором формирования фиброза и вероятно в группе больных с ГН, где он достоверно выше в крови, чем у здоровых детей (р<0,05), этот цитокин мож­но рассматривать как ранний маркер развития нефросклероза. Показатель TGF-β3 достоверно снижен у детей с микробно-воспалительными за­болеваниями почек и у детей с ГН по сравнению со здоровыми (р<0,05). Это объяснимо с учетом известных данных о его свойствах: TGF-β3 - про­тивовоспалительный цитокин, супрессирующий продукцию провоспалительных цитокинов и яв­ляющийся существенным ингибитором клеточно­го иммунитета [20, 21]. Нами выявлена сильная положительная корреляционная связь между IL- 10 и TGF-β3 (R = 0,88) в крови у детей с МВЗП. В собственных исследованиях, проводимых нами ранее, выявлено, что уровень цитокина TGFβ1 в моче у пациентов 3-й и 4-й групп достоверно (и закономерно) выше, чем у детей контрольной группы (U221/0,035, р<0,05 и 169/0,033, р<0,05 соответственно) [24]. Интересно, что уровень цитокина TGFβ3 в моче у детей с обменными за­болеваниями оказался достоверно выше, чем у здоровых детей, что требует дальнейшего иссле­дования и обсуждения [25].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Повышение показателя TNF-α в сыворотке крови рекомендуется рассматривать как специ­фичный маркер имунного воспаления, а также острого пиелонефрита и перехода его в хрониче­скую стадию, т.е. TNF-α можно считать универ­сальным цитокином, участвующим в различных патогенетических процессах при заболеваниях почек у детей. Снижение TNF-RII можно отнести к маркеру полной клинико-лабораторной ремис­сии пиелонефрита. Повышение TNF-α-ΚΙ возмож­но рассматривать в качестве маркера аутоимунно- го воспаления. Дефицит IL-2, ИЛ-10 и TGFβ3 при повышении IL-2 R в крови необходимо использо­вать как маркер бактериально-воспалительных и аутоиммунных заболеваний почек, а повышение TGFβ1 - как ранний маркер развития нефросклероза, в частности, у больных с гломерулонефритами. Увеличение ВИ - TNF-α/ИЛ-10 более чем в 4 раза дает возможность позиционировать его в качестве дополнительного диагностического критерия микробно-воспалительного и аутоим­мунного процесса в почках. Увеличение экскре­ции с мочой TNF-α на фоне снижения ИЛ-10 с сохранением стабильно высоких концентраций TGFβ1 является маркером воспаления и фиброза при микробно-воспалительных заболеваниях по­чек и гломерулонефритах. В более ранних наших экспериментальных работах мы определили те же данные по этим цитокинам в моче [24].

Таким образом, патологические процессы, лежащие в основе ХБП, сопровождаются изме­нением уровня провоспалительных и противо­воспалительных цитокинов. Гиперпродукция и дефицит цитокинов при ренальной дисфункции способствуют усилению и развитию воспаления различного характера, фиброза и нефросклероза. Предупреждение неблагоприятного исхода и ран­няя диагностика (1-2 стадии) ХБП у детей - одна из актуальных проблем детской нефрологии. Сво­евременная нефропротективная терапия, направ­ленная на торможение прогрессирования ХБП и ее осложнений, должна включать и коррекцию цитокинового статуса.

Список литературы

1. National Kidney Foudation Kidney Disease Outcomes Quality Initiatives. K/DOQI Clinical Practice Guidelines for Chronic Kidney Disease Evaluation Classification Stratification. Am J Kidney Dis 2002; (39)

2. National Kidney Foudation, s Kidney Disease Outcomes Quality Initiative. clinical practice guidelines for chronic kidney disease in children and adolescents: evaluation, classification, and stratification. Pediatrics 2003; (111): 1416-1421

3. Harambat J, van Stralen KJ, Kim JJ, Tizard EJ. Epidemiology of chronic kidney disease in children. Pediatr Nephrol 2012; (27): 363-373

4. Зорин ИВ, Вялкова АА. Прогнозирование прогрессирования тубуло- интерстициального поражения почек у детей с рефлюкс-нефропатией. Нефрология 2015; 3(19): 65-71 [Zorin IV, Vialkova AA. Predicting the progression of tubulo-interstitial kidney damage in children with reflux-nephropathy. Nephrologiya 2015; 3(19): 65-71]

5. Смирнов АВ, Шилов ЕМ, Добронравов ВА и др. Национальные рекомендации. Хроническая болезнь почек: основные принципы скрининга, диагностики, профилактики и подходы к лечению. Левша, СПб., 2013 [Smirnov AV, Shilov EM, Dobronravov VA et al. National recommendations. Chronic kidney disease: the basic principles of screening, diagnosis, prevention and treatment approaches. Levsha, SPb., 2013]

6. Козыро ИА, СукалоАВ. Хроническая болезнь почек у детей. Педиатрия. Восточная Европа 2013; 2: 112-119 [Kozy`ro IA, Sukalo AV. Chronic kidney disease in children. Pediatriya. Vostochnaia Evropa 2013; 2: 112-119]

7. Смирнов ИЕ, Кучеренко АГ, Комарова ОВ. Биомаркеры формирования нефросклероза при хронической болезни почек у детей. Российский педиатрический журнал 2014; 17 (6): 10-15 [Smirnov IE, KucherenkoAG, Komarova OV. Biomarkers for the formation of nephrosclerosis in chronic kidney disease in children. Rossii`skii` pediatricheskii` zhurnal 2014; 17 (6): 10-15]

8. Вялкова АА, Зорин ИВ, Гордиенко ЛМ и др. Вопросы диагностики хронической болезни почек у детей. Практическая медицина 2013; 6: 72-77 [ Vialkova AA, Zorin IV, Gordienko L.M. et al. Questions of diagnosis of chronic kidney disease in children. Prakticheskaia meditcina 2013; 6: 72 -77]

9. Антонов ОВ, Китаева ЮЮ, Комарова АА. Концепция «Хронической болезни почек». Хроническая болезнь почек у детей: актуальность проблемы, определение понятия, классификация, современные подходы к формулировке диагноза. Ч. 1. Вестник Сур ГУ. Медицина 2013; 1: 24-28 [Antonov OV, KeitaevaIuIu, Komarova AA. The concept of «Chronic Kidney Disease». Chronic kidney disease in children: the urgency of the problem, the definition of the concept, classification, modern approaches to the formulation of the diagnosis. Part 1. Vestneyk- Sur GU. Meditcina 2013; 1: 24-28]

10. Комарова ОВ, Кучеренко АГ, Смирнов ИЕ, Цыгин АН. Динамика содержания сывороточных маркеров апоптоза для оценки прогноза хронической болезни почек у детей. Вопросы современной педиатрии 2013; 12 (5): 104-107 [Komarova OV, Kucherenko AG, Smirnov IE, TCy`gin AN. Dynamics of the concentration of serum apoptosis markers for assessing the prognosis of chronic kidney disease in children. Voprosy` sovremennoi` pediatrii 2013; 12 (5): 104-107]

11. Паунова СС. Патогенетические основы нефросклероза (Обзор литературы). Нефрология и диализ 2005; 7 (2): 130-135 [Paunova SS. Pathogenetic bases of nephrosclerosis (Review of the literature). Nefrologiia i dializ 2005; 7 (2): 130-135]

12. Хворостов ИН, Смирнов ИЕ, Зоркин СН. Обструктивные уропатии у детей. Российский медицинский журнал 2007; 1: 50-54 [ Khvorostov IN, Smirnov IE, Zorkin SN. Obstructive uropathy in children. Rossii`skii` meditcinskii` zhurnal 2007; 1: 50-54]

13. Корякова НН, Рожденственнская ЕД, Казанцева СВ и др. Особенности цитокинового профиля у больных хроническим гломерулонефритом с прогрессирующей хронической почечной недостаточностью. Тер арх 2006; 7/8 (5): 14- 17 [Koriakova N.N, Rozhdenstvennskaia ED, Kazantceva SV i dr. Features of the cytokine profile in patients with chronic glomerulonephritis with progressive chronic renal failure. Ter.arkh. 2006; 7/8 (5): 14-17]

14. Жизневская ИИ, Хмелевская ИГ, Вазинькова НС, Калинина ЗН. Динамика иммунологических показателей при острых и хронических гломерулонефритах у детей. Фундаментальные исследования 2014; 4: 269-273 [Zhiznevskaia II, Khmelevskaia IG, Vazin`kova NS, Kalinina ZN. Dynamics of immunological parameters in acute and chronic glomerulonephritis in children. Fundamental`ny`eissledovaniia 2014; 4: 269-273]

15. Хворостов ИН, Смирнов ИЕ, Зоркин СН. Дисбаланс цитокинов как фактор риска прогрессирования обструктивныхуропатий у детей. Детская хирургия 2005; 4: 14-18 [KhvorostovIN, SmirnovIE, Zorkin. Cytokine imbalance as a risk factor for the progression of obstructive uropathies in children. Detskaiahirurgiia 2005; 4: 14-18]

16. Ни А, Быкова ОГ, Васильева ТГ. Диагностическая роль фактора некроза опухоли- альфа и его рецептора второго типа в моче и крови у детей с пиелонефритом. Тихоокеанский медицинский журнал 2014; 4: 29-30 [Ni A, By`kova OG, Vasil`eva TG. Diagnostic role of tumor necrosis factor-alpha and its second type receptor in urine and blood in children with pyelonephritis. Tihookeanskii` meditcinskii` zhurnal 2014; 4: 29-30]

17. Карзакова ЛМ, Автономова ОИ, Степанова ИМ и др. Особенности цитокинового статуса при различных клинических вариантах гломерулонефрита. Клиническая лабораторная диагностика 2015 (6): 33-36. [Karzakova LM, Avtonomova OI, Stepanova IM et al. Features of cytokine status in various clinical variants of glomerulonephritis. Clinicheskaia laboratornaia diagnostika 2015 (6): 33-36]

18. Chevalier RL, Klahr S. Therapeutic approaches in obstructive uropathy. Semin Nephrol 1998;18 (6): 652-658

19. Klahr S. Obstructive nephropathy. Intern Med 2000; 39 (5): 355-361

20. Кетлинский СА, Симбирцев АС. Цитокины. Фолиант, СПб., 2008; 552 [Ketlinskii` SA, Simbirtcev AS. Cytokines. SPb: OOO «Izdatel`stvo Foliant». 2008; 552]

21. Хаитов РМ, Пинегин БВ, Ярилин АА. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы: руководство для врачей. ГЭОТАР – Медиа. М., 2009; 352 [Haitov RM, Pinegin BV, Iarilin AA. Guide to Clinical Immunology. Diagnosis of diseases of the immune system: a guide for doctors`. GEOTAR – Mеdia, M., 2009; 352]

22. Am. J. Clinical Practice Guidelines For Chronic Kidney Disease: Evaluation, Classification and Stratification. Kidney Dis 2003; 3 (42): 1-202

23. Schwartz GJ, Munoz A, Schneider MF et al. New equations to estimate GFR in children with CKD. J Am Soc Nephrol 2009; 20: 629-637

24. Семешина ОВ, Лучанинова ВН, Маркелова ЕВ и др. Особенности экскреции цитокинов с мочой при хронической болезни почек у детей. Клиническая нефрология 2017 (3): 46- 53 [Semeshina OV, Luchaninova VN, Markelova EV i dr. Features of excretion of cytokines with urine in chronic kidney disease in children. Clinicheskaia nefrologiia 2017 (3): 46-53]

25. Вялкова АА, Зорин ИВ. Роль трансформирующего фактора роста в формировании и прогрессировании интерстициального фиброза у детей с пузырно-мочеточниковым рефлюксом. Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал) 2013; 4: 1-9 [Vialkova AA, Zorin IV. The role of the transforming growth factor in the formation and progression of interstitial fibrosis in children with vesicoureteral reflux. Biulleten` Orenburgskogo nauchnogo centra UrO RAN (e`lektronny`i` zhurnal) 2013; 4: 1-9]

26. Глыбочко ПВ, Морозов ДА, Свистунов АА и др. Цитокиновый профиль крови и мочи у детей с обструктивными уропатиями. Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье» 2010 (2): 52-57 [Gly`bochko PV, Morozov DA, Svistunov AA i dr. Cytokine profile of blood and urine in children with obstructive uropathies. Kurskii` nauchno-prakticheskii` vestneyk «Cheloveki egozdorov`e» 2010 (2): 52-57]

27. Жизневская ИИ, Хмелевская ИГ. Особенности цитокинового профиля при гломерулопатиях у детей. Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье» 2013 (1): 62-66 [Zhiznevskaia II, KHmelevskaia IG. Features of the cytokine profile in children with glomerulopathies. Kurskii` nauchno-prakticheskii` vestneyk «Chelovek i egozdorov`e» 2013 (1): 62-66]

28. Елизарова СЮ, Королева ИВ, Сидорович ОВ, Нестеренко ОВ. Современная иммуносупрессивная терапия нефротического синдрома у детей. Международный журнал экспериментального образования 2014; 5: 44-45 [Elizarova SIu, Koroleva IV, Sidorovich OV, Nesterenko OV. Modern immunosuppressive therapy of nephrotic syndrome in children. Mezhdunarodny`i` zhurnal e`ksperimental`nogo obrazovaniia. 2014; 5: 44-45]

29. Сокуренко СИ, Федосеев АН, Борисова ТВ. Иммунологические нарушения у пациентов с ХБП. Перспективы иммунозаместительной терапии. Клиническая практика 2014; 3: 83-88 [Sokurenko SI, Fedoseev AN, Borisova TV. Immunological disorders in patients with CKD. Prospects of immunosupplement therapy. Perspektivy` immunozamestitel`noi` terapii. Clinicheskaia praktika 2014; 3: 83-88]


Об авторах

О. В. Семешина
Краевая детская клиническая больница №1 Тихоокеанский государственный медицинский университет
Россия

690078, Россия, г. Владивосток, пр. Острякова, д. 27

690106, Россия, г. Владивосток, пр. Острякова, д. 2

Семешина Ольга Владимировна, канд. мед. наук, нефрологическое отделение, институт педиатрии Тел.: 8(423) 245-54-43



В. Н. Лучанинова
Краевая детская клиническая больница №1 Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова
Россия

191015, Россия, Санкт-Петербург, ул. Кирочная, д. 41

Проф. Лучанинова Валентина Николаевна, д-р мед. наук, кафедра педиатрии и детской кардиологии. Тел.: 8-911-151-04-01



А. Ни
Тихоокеанский государственный медицинский университет
Россия

690106, Россия, г. Владивосток, пр. Острякова, д. 2

Проф. Ни Антонина, д-р мед. наук, институт педиатрии. Тел.: 8-232-456-349



Е. В. Маркелова
Тихоокеанский государственный медицинский университет
Россия

690106, Россия, г. Владивосток, пр. Острякова, д. 2

Проф. Маркелова Елена Владимировна, д-р мед. наук, кафедра патологической и нормальной физиологии. Тел.: 8-914-707-85-59



Н. В. Горелик
Краевая детская клиническая больница №1
Россия

690078, Россия, г. Владивосток, пр. Острякова, д. 27

Горелик Надежда Викторовна главный врач, Тел.: 8-914-705-00-50



А. С. Крутова
Краевая детская клиническая больница №1
Россия

690078, Россия, г. Владивосток, пр. Острякова, д. 27

Крутова Александра Сергеевна нефрологическое отделение. Тел.: (423)245-54-43



О. Г. Быкова
Тихоокеанский государственный медицинский университет
Россия

690106, Россия, г. Владивосток, пр. Острякова, д. 2

Быкова Ольга Геннадьевна, канд. мед. наук, институт педиатрии. Тел.: 8-902-520-77-38



Для цитирования:


Семешина О.В., Лучанинова В.Н., Ни А., Маркелова Е.В., Горелик Н.В., Крутова А.С., Быкова О.Г. ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ЦИТОКИНОВОГО ПРОФИЛЯ СЫВОРОТКИ КРОВИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ ПОЧЕК У ДЕТЕЙ. Нефрология. 2018;22(4):81-89. https://doi.org/10.24884/1561-6274-2018-22-4-81-89

For citation:


Semeshina O.V., Luchaninova V.N., Nee A., Markelova E.V., Gorelik N.V., Krutova A.S., Bykova O.G. DIAGNOSTIC SIGNIFICANCE OF BLOOD SERUM CYTOKINE PROFILE FOR CHRONIC KIDNEY DISEASE IN CHILDREN. Nephrology (Saint-Petersburg). 2018;22(4):81-89. (In Russ.) https://doi.org/10.24884/1561-6274-2018-22-4-81-89

Просмотров: 238


ISSN 1561-6274 (Print)
ISSN 2541-9439 (Online)